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    TTC染色步驟和數據分析由普拉特澤生物組織染色實驗平臺為大家總結分享。普拉特澤生物為廣大科研人員提供長期穩定的TTC染色外包實驗服務，本文給大家分享咱們技術長期總結下來的TTC染色步驟+數據分析：

1.大鼠麻醉后，快速取出腦組織(10min內);

2.置于0-4℃℃PBS溶液中轉移，將腦組織-20℃冷凍20min;

3.將冷凍后的腦組織切成厚度為2 mm的薄片;

4.將腦組織切片置于1%TTC溶液中，37℃℃避光孵育30min，每5min輕微晃動容器，使充分染色。

5.取出染好的切片，觀察染色情況，白色即為梗死區域。

6.選擇每一切片的尾側面用病理圖文分析系統進行圖像分析,測量每片的梗死面積和總面積。(每層梗死體積為該層梗死面積和層厚的乘積,各層的梗死體積之和即為總的梗死體積。

二、TTC計算分析:

1.原始圖片數據(PS初步合圖處理)2.分析處理步驟:純黑或純白背景轉換

(1)process(2)segmentation

（3）color cube basedwhite or black(5)吸管工具(不停點擊切片位置，選取圖片)(6)create previewimage

三、TTC計算分析:

1.計算分析步驟:
(1)measure
(2)count/size

(3)Select colors
(4)調整顏色通道:HSI通道 H:0-255;S:0-255;1:14-255

四、TTC計算分析:

3.計算分析步驟:(5)Measure-Select Measure

(6)設置面積選擇大小(1)area(2)1000-1000000(可根據實際情況而定)

五、TTC計算分析:

3.計算分析步驟:

(7)Count:開始計算

(9)查看計算結果和數據統計:

(8)計算后界面顯示:

六、TTC計算分析:
4.數據查看與導出:

導出步驟一:data to file導出步驟二:選擇導出格式

5.梗死面積選定設置:

HIS模式H:0-255;S:0-45;1:150-255(可根據實際情況調整)

6.設置完成，開始統計計算:count;后面步驟和前面總面積計算一樣進行，查看數據統計與數據文件導出，最后統計數據

7.總結總體面積與梗死面積，統計分析數據，得出結論，

如果你總是在做實驗時總會遇上這樣那樣的問題需要幫助時，請記得在TTC染色實驗中遇到技術問題可添加技術微信：18570028002我司還提供組織染色外包服務或實驗培訓