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甲苯胺藍染色步驟

2025-02-12 17:32:25

來源/作者:普拉特澤-生物醫學整體課題外包平臺

    甲苯胺藍染色步驟由普拉特澤生物病理實驗平臺為大家總結分享。普拉特澤生物為廣大科研人員提供長期穩定的番紅固綠染色外包實驗服務

本文給大家分享咱們技術長期總結下來的動物組織番紅固綠組織染色實驗步驟:

甲苯胺藍染色在組織學和細胞學實驗中可是個重頭戲,它能幫助我們清晰地觀察到細胞的結構和成分。

一、準備階段?

⒈獲取待染色的組織標本,這可以是活體組織或已經固定的組織切片。

⒉將組織標本進行固定,常用的固定劑有10%緩沖福爾馬林溶液或4%的緩沖乙醛溶液。固定時間根據組織的大小和類型而定,一般為數小時至過夜。

二、脫水與滲透?

Step1:將固定后的組織標本進行脫水處理,常用的脫水劑為乙醇。脫水過程中,逐漸將組織標本從低濃度的乙醇轉移到高濃度的乙醇中,直至完全脫水。

Step2:將脫水后的組織標本進行滲透處理,常用的滲透劑為二甲苯。將組織標本逐漸轉移到二甲苯中,確保組織完全滲透。

?包埋與切片?

Step3:將滲透后的組織標本進行包埋處理,常用的包埋劑為石蠟。

Step4:將包埋后的組織標本進行切片,切片厚度一般為4~6微米。切片工具常用的是組織切片機。

1)脫蠟至水?

Step5:將切片放入二甲苯中浸泡脫蠟,一般需要經過三個二甲苯缸,每個缸浸泡5~10分鐘。

Step6:使用無水乙醇、95%乙醇和75%乙醇依次浸泡切片,每個濃度浸泡1分鐘左右,目的是去除切片上的二甲苯,并使切片逐漸水化。

用自來水沖洗切片數秒,洗去殘留的乙醇。

2?)染色?

Step7:將切片放入甲苯胺藍染色液中,染色時間通常為20~30分鐘。具體時間可根據實驗需求和切片情況適當調整。

Step8:在染色過程中,要確保切片完全浸泡在染色液中,并輕輕搖動染色缸,使染色更加均勻。


?3)分化?

Step9:染色完成后,使用95%乙醇或1%鹽酸酒精進行分化,去除多余的染料。分化過程中要在顯微鏡下觀察切片,控制分化效果。分化時間不宜過長,避免過度分化導致染色過淺。

?脫水透明

Step10:將分化后的切片再次放入無水乙醇中脫水,確保切片上的水分被完全去除。

Step11:將脫水后的切片放入二甲苯中進行透明處理,一般需要經過三個二甲苯缸,每個缸浸泡1~2分鐘。透明過程中要確保切片完全浸泡在二甲苯中,使切片變得透明清晰。

4?)封片與觀察?

Step12:在石蠟切片的中央滴加一滴中性樹膠,然后蓋上蓋玻片進行封固。封片時要避免產生氣泡,以免影響觀察效果。

Step13:封片完成后,將切片放在顯微鏡下觀察。在顯微鏡下,你可以清晰地看到細胞核被染成藍色,肥大細胞等特定細胞結構也呈現出獨特的染色效果。


怎么樣?甲苯胺藍的染色步驟是不是既詳細又清晰呢?只要按照上述步驟操作,你就能輕松掌握這項技術啦:18570028002(甲苯胺藍的染色實驗指導)
記得在實驗過程中要注意安全哦!