細胞凋亡檢測實驗注意事項——細胞凋亡實驗外包
2022-03-17 13:29:46
來源/作者：普拉特澤-生物醫學整體課題外包平臺
流式檢測細胞凋亡注意事項介紹由普拉特澤生物流式檢測平臺總結歸納。普拉特澤生物流式檢測平臺承接細胞周期檢測、增殖檢測、凋亡檢測等流式實驗外包，擁有上千例流式實驗的經驗，實驗快周期短，是您科研路上的鐵哥們兒哦！
凋亡細胞在形態上可見與周圍細胞脫離接觸，細胞變圓，細胞膜向內皺縮、胞漿濃縮、內質網擴張、細胞核固縮破裂呈團塊狀或新月狀分布、內質網和細胞膜進一步融合將細胞分成多個完整包裹的凋亡小體，凋亡小體zui后被吞噬細胞吞噬消化。在凋亡過程中細胞內容物并不釋放到細胞外，不會影響其它細胞，因而不引起炎癥反應。
OK，話不多說我們來看看有哪些注意事項吧。
1、誘導培養檢測凋亡的細胞的時間要準確
1、旋帽離心管裝的試劑在開蓋前需要短暫離心，將蓋內壁上的液體用至離心管底，盡量避免開蓋時液體灑落出來。
2、Annexin V-FITC和Propidium iodide是光敏物質，流式檢測保存與操作時請注意避光。
3、Propidium iodide(PI)能通過皮膚吸收，對眼睛有刺激作用，所以實驗過程中一定要注意保護好自己裸露在外的皮膚，戴好手套。
4、在細胞洗滌的后一步，請盡量將上清棄凈，以免PBS殘留影響實驗結果。
5、PI染色時間過長有可能造成檢測的凋亡率偏高，建議首先進行Annexin V-FITC熱色，上機前5分鐘再加入PI熱色。
6、整個操作過程動作要盡量輕柔，勿用力吹打細胞，盡量在4℃下操作。
7、.熒光顯微鏡下觀察細胞時，由于熒光易碎滅，觀察時要盡量快。反應完畢后盡快檢測，因為細細胞凋廣檢測是一個動態的過程，反應1小時后熒光強度就開始衰變。
8、成功的檢測凋亡受以下幾種因素的影響，如細胞類型、細胞膜上PS的密度、發生凋亡時PS翻轉的比例、誘導細胞凋亡的方法、所用試劑、誘導凋亡的時間等，把這些影響因素進行優化對實驗成功是非堂必要的。
那么用流式進行細胞凋亡檢測實驗操作中的注意事項我們就講完了，科研很累但是做對了結果很美，還有其他的主義是系那個需要補充·或者有不懂問題的可以給客服留言技術會及時回復您的，如果您有細胞凋亡檢測或生物實驗外包相關的實驗需求普拉特澤永遠在線哦~
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