
免疫組化實驗技術介紹【科研人入】
2022-06-17 15:59:50
來源/作者:普拉特澤-生物醫學整體課題外包平臺
今天普拉特澤生物跟大家一起學習的實驗就是免疫組化。免疫組化,是應用免疫學基本原理——抗原抗體反應,即抗原與抗體特異性結合的原理,通過化學反應使標記抗體的顯色劑(熒光素、酶、金屬離子、同位素)顯色來確定組織細胞內抗原(多肽和蛋白質),對其進行定位、定性及相對定量的研究。普拉特澤生物病理實驗平臺專業承接免疫組化實驗代做,提供優質、真實的病理檢測服務。

免疫組化技術的基本原理是利用抗體和抗原之間的結合具有高度的特異性,免疫組織化學正是利用了這一原理。先將組織或細胞中的某種化學物質提取出來,以此作為抗原或半抗原,通過免疫動物后獲得特異性的抗體,再以此抗體去探測組織或細胞中的同類的抗原物質。由于抗原與抗體的復合物是無色的,因此還必須借助于組織化學的方法將抗原抗體結合的部位顯示出來,以期達到對組織或細胞中的未知抗原進行定性,定位或定量的研究。
那么為什么免疫組化我們用的這么多呢?它有哪些臨床上不可代替的作用呢:
(1)惡性腫瘤的診斷與鑒別診斷;
(2)確定轉移性惡性腫瘤的原發部位;
(3)對某類腫瘤進行進一步的病理分型;
(4)軟組織腫瘤的治療一般需根據正確的組織學分類,因其種類多、組織形態相像,有時難以區分其組織來源,應用多種標志進行免疫組化研究對軟組織腫瘤的診斷是不可缺少的;
(5)發現微小轉移灶,有助于臨床治療方案的確定,包括手術范圍的確定。
(6)為臨床提供治療方案的選擇。
免疫組織化學技術按照標記物的種類可分為免疫熒光法、免疫酶法、免疫鐵蛋白法、免疫金法及放射免疫自顯影法等,這些常用免疫組織化學方法的原理如下:
1. 免疫熒光細胞化學技術
將已知抗體標上熒光素,以此作為探針檢查細胞或組織內的相應抗原,在熒光顯微鏡下觀察.當抗原抗體復合物中的熒光素受激發光的照射后會發出一定波長的熒光,從而可以確定組織中的抗原定位或定量.
2. 免疫酶細胞化學技術
是免疫組織化學研究中最常用的技術.基本原理是先以酶標記的抗體與組織或細胞作用,然后加入酶的底物,生成有色的不溶性產物或具有一定電子密度的顆粒,通過光鏡或電鏡,對細胞或組織內的相應抗原進行定位或定性研究.
3. 免疫膠體金技術
就是用膠體金標記一抗,二抗或其他的能特異性的結合免疫球蛋白的分子(如葡萄球菌A蛋白)等作為探針對組織或細胞內的抗原進行定性,定位或定量研究.由于膠體金的電子密度高,多用于免疫電鏡的單標記或多標記的定位研究。
免疫組化實驗看似容易,但真想把它做好,還是需要花上很長一段時間去積累和摸索經驗。如果還有不懂的同學歡迎隨時留言,一起學習進步哦!
