
Dot Blot實(shí)驗(yàn)和western blot實(shí)驗(yàn)有何區(qū)別?
2023-04-24 14:34:40
來源/作者:普拉特澤-生物醫(yī)學(xué)整體課題外包平臺(tái)
提問:Dot Blot實(shí)驗(yàn)和western blot實(shí)驗(yàn)有何區(qū)別?
Dot Blot和Western Blot是兩種檢測(cè)目標(biāo)蛋白質(zhì)存在的常用方法。它們之間有以下區(qū)別
1. 基本原理:Dot Blot實(shí)驗(yàn)在膜上直接滴點(diǎn)分析樣品中是否存在特定蛋白質(zhì),而Western Blot實(shí)驗(yàn)先通過SDS-PAGE將樣品中的蛋白質(zhì)進(jìn)行分
離,再根據(jù)特異性抗體來檢測(cè)某個(gè)具體的蛋白質(zhì)。
2. 操作難度:相比較Western Blot, Dot Blot相對(duì)容易進(jìn)行,縮短了實(shí)驗(yàn)周期和操作時(shí)間。
3. 靈敏度:Western Blot方法比Dot Blot更為靈敏,并且可以提供分子量等更具精度的信息; 而當(dāng)需要非常高的靈敏度時(shí),摸索Dot Blot實(shí)驗(yàn)是一個(gè)更好的選擇,因?yàn)閃estem blot 分析所需的蛋白質(zhì)數(shù)量,通常至少為Dot Blot實(shí)驗(yàn)所需的10倍。
4. 樣品來源及基質(zhì)構(gòu)成限制:由于Dot Blot不需要對(duì)蛋白進(jìn)行電泳分離,所以幾乎可以用任何類型的樣品及其提取物,對(duì)于卡路里較低的無脂血清及其他時(shí)要求不影響蛋白質(zhì)三維結(jié)構(gòu)配合的實(shí)驗(yàn),這一特點(diǎn)尤其重要。

總之,根據(jù)實(shí)際需要和操作現(xiàn)實(shí)性進(jìn)行選擇。當(dāng)需要驗(yàn)證特定蛋白質(zhì)的存在或數(shù)量時(shí),Dot Blot是更為常規(guī)的方法;而當(dāng)時(shí)間成本較高或者所需樣品有限時(shí),則可以選擇Dot Blot實(shí)驗(yàn)。
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