ELISA實驗材料
來源/作者:普拉特澤-生物醫學整體課題外包平臺
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ELISA(Enzyme-Linked Immunosorbent Assay),即酶聯免疫吸附測定,是一種廣泛應用于生物學、醫學及生物技術領域的分析技術,主要用于檢測液體樣本(如血清、血漿、尿液等)中的特定抗原或抗體。該技術結合了抗原抗體反應的特異性和酶的高效催化作用,具有高靈敏度、強特異性及可重復性好等優點。以下是進行ELISA實驗所需的基本材料清單及簡要說明:
㈠實驗試劑
①標準品與質控品:用于建立標準曲線和質量控制,確保實驗結果的準確性和可靠性。
②捕獲抗體:特異性結合待測抗原的抗體,通常固定在微孔板底部,用于捕獲樣本中的目標抗原。
③檢測抗體(或二抗):標記有酶(如辣根過氧化物酶HRP、堿性磷酸酶ALP等)的抗體,能與捕獲的抗原結合,形成抗原-抗體-酶標抗體復合物。
④底物溶液:酶催化反應所需的底物,經酶催化后產生可檢測的信號(如顏色變化),常用底物有TMB(四甲基聯苯胺)、OPD(鄰苯二胺)等。
⑤終止液:用于停止酶促反應,使顏色變化穩定,便于讀取結果,常見終止液為硫酸。
⑥洗滌緩沖液:用于清洗微孔板,去除未結合或非特異性結合的物質,保證實驗的特異性。
⑦樣本稀釋液:用于稀釋待測樣本,以適應實驗檢測范圍。
大鼠elisa試劑盒
大鼠elisa試劑盒
㈡實驗器材
①微孔板(如96孔板):作為反應容器,底部預包被有捕獲抗體。
②微量移液器及槍頭:精確轉移液體,確保實驗操作的準確性。
③振蕩器:混勻樣本和試劑,確保反應均勻。
④酶標儀:測量微孔板中各孔的吸光度值,用于定量分析。
⑤恒溫培養箱:提供穩定的溫度環境,保證抗原抗體反應在最佳條件下進行。
⑥磁力攪拌器(可選):用于制備某些需要攪拌的試劑。
⑦洗板機(自動化ELISA設備中常見):自動完成洗滌步驟,提高實驗效率。
㈢ 輔助材料
①無菌手套:保護實驗人員免受污染,同時避免樣本間交叉污染。
②實驗室防護服及護目鏡:確保實驗人員安全,防止有害物質濺入眼睛或皮膚。
③廢液缸:收集實驗過程中產生的廢液,統一處理。
④標簽及記號筆:標記樣本和試劑,避免混淆。
⑤記錄本:詳細記錄實驗步驟、觀察結果及實驗條件,便于后續數據分析和復現實驗。
㈣結論
ELISA實驗的成功依賴于高質量的實驗材料、嚴格的實驗操作以及精確的數據分析。準備齊全且符合要求的實驗材料是實驗成功的第一步。通過合理選擇和使用上述材料,結合科學的實驗設計和操作規范,可以確保ELISA實驗結果的準確性和可靠性,為科研和臨床診斷提供有力支持。
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