
HE染色常見問題分析和解決方法【匯總】
2024-02-22 15:29:24
來源/作者:普拉特澤-生物醫學整體課題外包平臺
染色法是組織學和病理學領域常用的染色技術。這種染色方法以其簡單易行、效果穩定而受到廣大科研人員的青睞。然而,即便是再熟練的實驗者,在HE染色的過程中也難免會遇到一些問題和困惑。普拉特澤生物將為您解析HE染色過程中常見的幾個問題,并提供相應的解決方案,幫助您避免實驗中的陷阱。
一、染色不均一
問題描述:在HE染色過程中,有時會出現組織切片染色不均一的現象,表現為部分區域染色過深或過淺。
解決方法:
①控制染色時間:根據組織的類型和切片厚度,合理調整染色時間,確保染料充分滲透到組織內部。
②優化染色液濃度:根據染色效果,適時調整蘇木精和伊紅染液的濃度,以獲得最佳的染色效果。
③均勻涂抹切片:在染色前,確保切片表面清潔無污漬,并使用適當的方法(如滴染法)使染料均勻涂抹在切片上。
依照慣例,搬上我們的優秀案例:

二、背景著色
問題描述:在HE染色過程中,背景部分(如間質、血管等)容易出現非特異性著色,影響觀察效果。
解決方法:
①減少染色時間:適當縮短染色時間,減少染料與組織非特異性結合的機會。
②使用分化液:在染色過程中,使用適當濃度的分化液(如鹽酸酒精)對切片進行分化處理,去除多余染料。
③增加洗滌次數:染色后,增加切片在清水中的洗滌次數和時間,確保多余的染料被徹底清除。
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三、細胞核著色不佳
問題描述:在HE染色中,細胞核的著色是判斷染色效果的關鍵指標之一。但有時會出現細胞核著色過淺或模糊不清的現象。
解決方法:
①調整蘇木精濃度:根據細胞核的著色情況,適時調整蘇木精染液的濃度,以獲得更好的著色效果。
②增加染色時間:對于著色不佳的細胞核,可以適當延長其在蘇木精染液中的染色時間。
③使用分化液處理:在染色過程中,適時使用分化液對切片進行分化處理,使細胞核著色更加清晰。
優秀案例:

HE染色
四、細胞質著色不佳
問題描述:細胞質的著色效果直接影響到對細胞結構和功能的判斷。在實際操作中,有時會遇到細胞質著色過深或過淺的問題。
解決方法:
①調整伊紅濃度:根據細胞質的著色情況,適時調整伊紅染液的濃度,以獲得理想的著色效果。
②控制染色時間:根據切片類型和細胞質的特性,合理控制伊紅染色時間,避免過長或過短導致著色不佳。
③優化洗滌步驟:在染色后,確保切片在清水中的洗滌步驟充分有效,去除多余的染料,防止細胞質著色過深。
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五、切片脫落或破損
切片脫落或破損是HE染色過程中另一個常見的問題。這可能是由于切片處理不當、載玻片不干凈或染色過程中操作過于粗暴等原因導致的。為了防止切片脫落或破損,需要注意以下幾點:
①在切片過程中要保持切片刀的鋒利和切片的穩定性,避免切片過厚或過薄。
②載玻片應提前清洗干凈,并用適當的粘附劑處理,以增加切片與載玻片之間的粘附力。
③在染色過程中要輕拿輕放,避免過度搖晃或摩擦切片,以免導致切片脫落或破損。

HE染色作為生物學和醫學實驗中常用的染色方法,對于細胞的形態觀察和分析具有重要意義。然而,在實驗過程中,科研人員常常會遇到一些問題,影響染色效果和后續的觀察分析。通過本文的分析和解決方法,希望能夠幫助科研人員更好地掌握HE染色技術,提高染色效果,為后續的實驗分析提供準確可靠的數據支持。
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