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        彗星實驗操作步驟由普拉特澤生物為大家總結分享，文末附有彗星實驗操作視頻教程供大家學習。普拉特澤生物細胞實驗平臺專業承接彗星實驗代做、外包服務，彗星實驗作為細胞平臺的常規實驗，我們自己總寫了一套專業高質的操作步驟，在此分享給大家，歡迎交流分享哦：

        彗星實驗第一步：分離制備單細胞懸液：

        （1）體外培養的細胞株：用胰酶消化，最后用PBS懸浮吹打成單細胞懸液，細胞要計數，具體的量我前邊已經說過。

        （2）體內臟器細胞：處死動物，取出臟器，于Hanks’液中制備成單個細胞懸液。

        彗星實驗第二步：膠板制備：

        （1）取100μl于45℃水浴中保溫的0.5%NMA，鋪于磨沙載玻片上，形成底膠。蓋玻片推勻，不能有氣泡，4度凝固5至8分鐘。

        （2）水平取下蓋片，取100μl于37℃水浴中保溫的0.5%LMA與20μl細胞懸液（約400彗星實驗）。
   第三步：細胞裂解與電泳：

        （1）將制備好的膠板去掉蓋玻片后，浸于4℃預冷的細胞裂解液中，在4℃下裂解2.5到3小時。

        （2）取出膠板，用雙蒸水浸沒漂洗后放入電泳槽中，浸泡在4℃預冷的電泳液中解旋20分鐘。

        （3）玻片水平放置陽極端附近，4℃電泳20到25分鐘（25V，300mA）。可在電泳槽周圍加冰塊以保持低溫。

        彗星實驗第四步：中和與染色：

        （1）電泳結束，將膠板浸泡于中和液中，每次10分鐘，共中和3次，每次要更換中和液。最后晾干。

        （2）取出膠板，置于染色缸中，在2μg/ml的EB染色液中，暗處染色5到10分鐘。

        （3）蒸餾水漂洗2次，每次5分鐘。

        好啦，那實驗步驟我們就說到這里啦，視頻教程請點擊：《彗星實驗理論+實操》 。但是要提醒大家，不同的樣本和情況實驗步驟要相應的進行調整哦，如果有把握不準的歡迎給客服留言，技術會耐心給大家根據樣本情況調整實驗步驟，快來留言吧！