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裸鼠皮下成瘤實驗常見問題處理方法

2022-05-31 16:19:56

來源/作者:普拉特澤-生物醫學整體課題外包平臺

        大家好!今天 普拉特澤生物 跟大家一起學習的是裸鼠皮下成瘤操作過程中容易遇到的問題和處理方法。普拉特澤生物-動物實驗平臺專業承接各類動物成瘤、造模實驗代做,本文由技術根據多年實驗經驗總結而來,還不了解什么是裸鼠成瘤實驗的同學可以回去了解,循序漸進的學習哦。


        皮下成瘤介紹+實驗步驟

        裸鼠皮下成瘤實驗操作注意事項

          那現在我們就來看看,裸鼠皮下成瘤操作中有哪些容易發生的問題和解決的方法吧!

        1、這個實驗為什么用裸鼠而不用普通的老鼠或者小白鼠?

        裸鼠成瘤實驗用的裸鼠,最大的特點是沒有胸腺等免疫器官,它的免疫力幾乎為0,對腫瘤細胞沒有免疫作用,易于成瘤。

        自然狀態下的老鼠和小白鼠有完整的免疫系統。免疫系統有免疫防御、免疫自穩、免疫監視三大生理功能,并通過免疫識別和免疫排斥攻擊兩大生理反應起作用。具有完整免疫系統的老鼠和小白鼠,會通過免疫識別反應來識別自己與非己,發現注入的腫瘤細胞這種非己抗原后,會啟動免疫排斥攻擊反應進行殺滅,這樣腫瘤就很難形成,實驗就難以進行下去。

        2、小鼠瘤子長起來又消失?

        腫瘤塊先縮小,后變大很常見,很可能是炎癥反應,腫瘤細胞被小鼠自身吸收,繼續觀察腫瘤細胞吸收之后是否經過幾周還能長出來,長不起來建議換鼠。

        3、如何抓牢裸鼠?

        可以用左手拇指和食指捏緊裸鼠頸背部皮膚,小拇指夾住裸鼠尾巴,然后進行接種。

        4、是否可以在一只小鼠進行多個點荷瘤?

        不可以,一只老鼠就只能接種一個點。因為一個老鼠身上有多個腫瘤塊的情況下,可能會相互影響。

        5、均一性很差,腫瘤體積差距較大?

        如果荷瘤分組發現小鼠腫瘤體積差距很大,這可能跟小鼠周齡及接種細胞量不一致導致,建議重新做實驗分組。

        6、腫瘤長不出來是怎么回事?

        第一:腫瘤生長周期很慢,一周開始生長腫塊,大約需要1~2個月才能長成腫瘤。

        第二:可能是細胞狀態差,活力不好,或是腫瘤細胞不易成瘤,需加入Matrigel輔助或增大接種量或更換細胞系;

        第三:一方面可能是小鼠周齡太大,或小鼠免疫排斥,建議更換免疫缺陷程度更大的小鼠(Nod-scid小鼠,NOG小鼠>Nude裸鼠)


        7、腫瘤體積相差很大,大小不一?

        首先,不是所有的腫瘤都能夠長得均一形態規則。

        其次,荷瘤分組發現小鼠腫瘤體積差距很大,這可能跟小鼠周齡及接種細胞量不一致導致,建議重新做實驗分組。

        最后,一般構建腫瘤模型,裸鼠主要保證周齡,周齡小一點好。

        8、是否應用免疫抑制劑加速腫瘤生長?

        如果裸鼠荷瘤不生長,可以參考文獻,用免疫抑制劑如環磷酰胺(抑制裸鼠NK細胞活性)促進生長;不過最好不要為了縮短造模周期來加速生長,因為可能會造成潰爛,這樣就不得不中止實驗。所以一般情況下,應盡量符合細胞系本身的生長特性,不應過多地人為的干擾。

        最后,一般構建腫瘤模型,裸鼠主要保證周齡,周齡小一點好??傊闶蟪闪龈爬▉碚f就是,大膽的接種,勤觀察,勤記錄,一定要仔細記錄!

        那關于裸鼠成瘤實驗的所有內容我們就講完啦,還有更多不懂得歡迎留言給客服,技術會第一時間解答的哦~我們下個實驗見!