腦缺血動物模型構建實驗注意事項
2025-04-27 16:42:44
來源/作者：普拉特澤-生物醫學整體課題外包平臺
腦缺血動物模型是研究腦卒中病理機制和藥物開發的重要工具，在神經科學研究領域具有不可替代的價值，構建穩定可靠的腦缺血模型
由普拉特澤生物為大家總結分享，普拉特澤生物動物實驗平臺專業承接裸鼠成瘤實驗外包、動物造模等動物實驗代做服務，積累專業豐富的實驗操作經驗。上期我們分享標準化操作流程與常見問題解析后大家都說不夠詳細，有一些注意事項沒有寫出來，那今天咱們就為大家專門出一期腦缺血動物模型構建的實驗注意事項，幫助研究人員規避常見問題，提高實驗成功率。
一、腦缺血動物模型選擇注意事項
1. 模型類型選擇
①腦缺血動物模型主要分為全腦缺血模型和局灶性腦缺血模型兩大類：
②全腦缺血模型：適用于研究心臟驟停后全腦缺血損傷
③局灶性腦缺血模型：更接近人類缺血性卒中病理過程
局灶性腦缺血模型又可分為：
⒈永久性大腦中動脈閉塞模型(pMCAO)
⒉短暫性大腦中動脈閉塞模型(tMCAO)
2. 動物選擇考量
㈠大鼠：最常用，尤其是SD和Wistar大鼠
㈡小鼠：適合基因修飾研究，但手術難度較大
㈢年齡與體重：成年動物(大鼠250-300g，小鼠20-30g)結果更穩定
㈣性別差異：雌性動物對缺血更耐受，建議單一性別研究
二、手術操作關鍵注意事項
1. 術前準備
動物適應性飼養：至少3天，減少應激反應
禁食處理：手術前禁食6-12小時(不禁水)
麻醉選擇：異氟烷吸入麻醉為首選，易于控制麻醉深度
體溫維持：手術全程維持動物體溫37±0.5℃
2. 手術過程要點
線栓法MCAO模型關鍵技術點：
⑴頸動脈分離：
避免過度牽拉迷走神經
小心處理頸動脈分叉處的舌咽神經
⑵線栓插入：
選擇合適的線栓直徑(大鼠0.28-0.30mm，小鼠0.18-0.22mm)
硅膠涂層線栓可減少血管損傷
插入深度：大鼠18-22mm，小鼠10-12mm
⑶缺血時間控制：
tMCAO通常60-90分鐘
精確計時，使用激光多普勒監測更佳
3. 術后護理
①恢復期保溫：直至動物完全清醒
②疼痛管理：適當使用鎮痛藥物
③營養支持：提供易獲取的食物和飲水
④神經功能評估：24小時內定期觀察
三、質量控制關鍵指標
1. 手術成功率評估
神經功能評分：采用標準化量表如Longa評分
腦血流監測：激光多普勒血流儀確認血流下降>70%
TTC染色：確認梗死體積
2. 排除標準
術中死亡：通常<10%
蛛網膜下腔出血：立即排除
神經功能評分異常：如旋轉>4圈/分鐘
四、常見問題解決方案
1. 高死亡率處理
優化麻醉深度
提高手術熟練度
使用更細的線栓
2. 梗死體積變異大
標準化線栓插入深度
控制動物體重范圍
使用相同批次的線栓
3. 模型不穩定性
保持環境條件恒定
固定手術人員
建立標準操作流程(SOP)
五、倫理與替代方法考量
⑴3R原則應用：
減少動物數量
優化實驗設計
尋求替代方法
⑵人道終點設定：
明確實驗終止標準
減輕動物痛苦
⑶替代模型評估：
體外缺氧模型
器官芯片技術
計算機模擬
構建穩定可靠的腦缺血動物模型需要嚴格把控各個環節，從模型選擇、手術操作到術后評估都需標準化。遵循上述注意事項可顯著提高實驗成功率，獲得可靠的研究數據。
隨著技術進步，腦缺血模型的構建方法將不斷優化，為腦卒中研究提供更精準的工具。
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