瓊脂糖凝膠電泳試劑
2024-10-10 15:54:14
來源/作者：普拉特澤-生物醫學整體課題外包平臺
Question：瓊脂糖凝膠電泳試劑有哪些？（普拉特澤生物提供長期穩定的瓊脂糖凝膠外包服務）
答：瓊脂糖凝膠電泳是一種常用于生物化學和分子生物學實驗的技術，用于分離和鑒定DNA、RNA和蛋白質等生物大分子。
以下是瓊脂糖凝膠電泳所需的主要試劑及其相關信息的清晰歸納：
一、 瓊脂糖
①作用?：作為凝膠基質，用于制作凝膠板。
?②濃度?：瓊脂糖的濃度會影響凝膠的孔徑和分離效果。常用的瓊脂糖濃度范圍在0.3%至2.0%之間，具體濃度取決于待分離DNA片段的大小。
二、緩沖液
?類型?：
?①電泳緩沖液?：用于在電泳過程中提供離子和能量，維持樣品和電泳過程中的pH值穩定。常用的電泳緩沖液有Tris-乙酸(TAE)、Tris-硼酸(TBE)和Tris-磷酸(TPE)等。其中，TBE和TPE緩沖容量高，DNA分離效果好，但TPE在DNA回收時含磷酸鹽濃度高，容易使DNA沉淀；TAE緩沖容量相對較低，但價格較便宜。
②樣品制備緩沖液?：用于溶解和制備樣品，如TBE或THE（Tris-HCl, EDTA）緩沖液。這些緩沖液通常含有指示染料（如溴酚藍或二甲苯青FF）和蔗糖或甘油等，以增加樣品的比重和可見性。
核酸染料
?作用?：用于染色和可視化核酸樣品。
?常用染料?：
?㈠溴化乙錠(EB)?：高度靈敏的嵌入性芳香族熒光化合物，但具有致癌性，使用時需小心。EB在紫外光照射下可激發出橙紅色熒光，與DNA結合后熒光強度顯著增強。
?㈡其他替代染料?：如GoldView(GV)染料，靈敏度與EB相當，但更安全環保。
㈢蛋白質染料?作用?：用于染色和可視化蛋白質樣品。
㈣常用染料?：考馬斯亮藍、銀染料等。
瓊脂糖凝膠制備試劑
?除了瓊脂糖和緩沖液外?，還可能包括DNA酶抑制劑等，以防止DNA在制備過程中被降解。
樣品加載試劑
?如DNA Loading Buffer、Protein Loading Buffer等?，用于將樣品加載到凝膠板上，確保樣品在電泳過程中均勻遷移。
終止劑
?如瓊脂糖凝膠電泳終止劑?，用于終止電泳過程，但需注意其安全性和后續處理。
洗滌劑
?如70%乙醇、緩沖液等?，用于清洗實驗器材，確保實驗的清潔和準確性。
其他輔助試劑
?如移液器、吸頭、離心管、DNA Marker、蛋白質Marker等?，用于實驗操作和結果分析。
綜上所述，瓊脂糖凝膠電泳所需試劑種類繁多，每種試劑都發揮著重要作用。在實驗過程中，應根據實驗目的和具體要求選擇合適的試劑，并嚴格按照操作規程進行操作，以確保實驗結果的準確性和可靠性。
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