石蠟切片制作常見問題與解決方法【上】
來源/作者:普拉特澤-病理染色技術平臺
石蠟切片制作常見問題與解決方法由普拉特澤生物總結分享,石蠟切片不僅用于觀察正常細胞和組織的形態結構,也是病理學和法醫學等學科用以研究主要方法。
普拉特澤生物病理平臺代做各類組織樣本石蠟切片上萬例。石蠟切片雖簡單,卻也是很不容易掌握的,有時很容易成功,有時則由于某種因素而造成切片的質量低劣,甚至完全失敗。下面就跟大家一起分享這些制作過程中容易遇到的問題和解決的方法:
問題一、切片上卷且不能形成連續蠟帶
原因:
1、切片刀不夠鋒利。
2、切片刀與蠟塊的角度不當。
3、’蠟塊四周留蠟邊太少。
4、石蠟硬度過大,黏度不夠。
解決方法:
1、更換新的切刀片。
2、調整切片刀的角度。
3、可重新包埋或將蠟塊四周熔化,再放入包埋框中補蠟,修理蠟塊時組織塊周圍保留的石蠟以2mm左右為宜。
4、蠟塊過硬可適當加些蜂蠟,或更換熔點較低的石蠟重新包埋。
問題二、切片彎曲且不能形成直帶
原因:
1、蠟塊上下或左右兩邊不平行。
2、蠟塊與切片刀刀口不平行。
3、組織塊外形不整齊。
4、切片刀各處的鋒利程度不一致。
解決方法:
1、蠟塊四邊反復修平對稱。
2、調節蠟塊夾持器,使其與切片刀平行。
3、修整組織塊時,注意修切整齊。
4、移動切片刀,更換刀口位置。
問題三、切片上出現裂紋
原因:
1、切片刀上有小缺口或刀口不平整。
2、組織中可能含有較硬的物質,如固定液的結品石灰質。
3、包埋時石蠟凍結太慢。
解決方法:
1、切片刀某處有缺口,可調換刀口部位或重新更換切刀片。
2、組織中硬性物質太多,則不宜用
3、待蠟塊周圍凝結成一層,即放入冷水中。
問題四、切片粘在切片刀上或蠟塊上且不易取下
原因:
切片時有靜電作用,產生靜電吸引,在冬季或氣候干燥時常出現這種情況。
解決方法:
可用加濕器,以增加空氣中的水分,而減少靜電作用。
問題五、切片厚薄不均
原因:
1、片微動部分失靈,齒輪跳格。
2、蠟塊太大,過硬,轉動時刀刃受震動。
解決方法:
1、修理切片機失靈的部分,調整理施,加機油潤滑零件,必要時需請專業技術人員調整切片 機。
2、如蠟塊過大,取材時注意取材的大小。蠟塊組織過硬,可放回水中浸泡,再重新脫水和包埋。
問題六、切片碎爛或組織脫出并與石蠟分離
原因:
1、組織脫水,透明不夠。
2、浸蠟時間過長;溫度過高。
3、組織脫出是由于脫水、透明時間不夠,或組織中含有乙醇等,石蠟不易滲入組織中,故導致石蠟與組織分離。
4、二甲苯存放時間過久。
解決方法:
1、按組織大小選擇脫水、透明時間。
2、依據組織的性質和結構特點確定浸蠟時間和包埋溫度。一般這種情況后期難以補救
3、重新融化,退回入二甲苯和酒精,再進行滲蠟包埋。
4、更換二甲苯。
好啦,那關于石蠟切片操作的常見問題以及解決方法上篇我們就介紹到這里啦,下期分享石蠟切片常見問題解決方法下篇,還遇到了其他問題的同學可以留言,普拉特澤會一一回復的哦~我們下期見!