外泌體提取的具體方法及步驟
2023-08-24 17:22:54
來源/作者：普拉特澤-生物醫(yī)學整體課題外包平臺
外泌體提取的具體方法及步驟由普拉特澤生物工具平臺總結分享，工具平臺為廣大科研實驗人員提供外泌體提取實驗服務，先一起來學習學習外泌體提取的具體方法及步驟吧~
以下是外泌體提取的詳細步驟：
樣本收集：根據實驗需要，選擇合適的樣本，如細胞培養(yǎng)上清液、血漿、尿液等含有外泌體的樣本。收集樣本時要注意避免細胞碎片和大顆粒物質的污染。
樣本預處理：將樣本進行低速離心，通常在300-2,000 g的離心力下離心10-20分鐘，以去除細胞碎片和大顆粒物質。離心條件可以根據樣本類型和實驗要求進行調整。
進一步離心：將上一步得到的上清液進行更高速度的離心，通常在10,000-20,000 g的離心力下離心30分鐘，以沉淀外泌體。離心時間和離心力可以根據樣本類型和實驗要求進行調整。
洗滌：將外泌體沉淀用PBS（磷酸鹽緩沖液）或其他合適的洗滌緩沖液進行洗滌，去除雜質。洗滌時可以輕輕攪拌或振蕩，以幫助去除雜質。
再次離心：將洗滌后的外泌體沉淀用更高速度的離心力離心，通常在100,000 g的離心力下離心1小時，以沉淀外泌體。離心時間和離心力可以根據樣本類型和實驗要求進行調整。
上清液去除：將上清液盡量去除，保留外泌體沉淀。可以使用吸管或移液器小心地吸除上清液。
再次洗滌：將外泌體沉淀用PBS或其他合適的洗滌緩沖液進行再次洗滌，去除殘留的雜質。洗滌時可以輕輕攪拌或振蕩。
再次離心：將洗滌后的外泌體沉淀用更高速度的離心力離心，通常在100,000 g的離心力下離心1小時，以沉淀外泌體。離心時間和離心力可以根據樣本類型和實驗要求進行調整。
上清液去除：將上清液盡量去除，保留外泌體沉淀。可以使用吸管或移液器小心地吸除上清液。
再次洗滌：將外泌體沉淀用PBS或其他合適的洗滌緩沖液進行再次洗滌，去除殘留的雜質。洗滌時可以輕輕攪拌或振蕩。
最后一次離心：將洗滌后的外泌體沉淀用更高速度的離心力離心，通常在100,000 g的離心力下離心1小時，以沉淀外泌體。離心時間和離心力可以根據樣本類型和實驗要求進行調整。
上清液去除：將上清液盡量去除，保留外泌體沉淀。可以使用吸管或移液器小心地吸除上清液。
再次洗滌：將外泌體沉淀用PBS或其他合適的洗滌緩沖液進行再次洗滌，去除殘留的雜質。洗滌時可以輕輕攪拌或振蕩。
外泌體沉淀的保存：將洗滌后的外泌體沉淀用適當的緩沖液進行懸浮，可以用于后續(xù)的實驗分析。外泌體可以在-80°C的冰箱中保存，避免多次凍融。
需要注意的是，外泌體提取的具體方法和步驟可能會因實驗目的、樣本類型和實驗條件的不同而有所變化，上述步驟僅供參考。在進行外泌體提取實驗時，應根據具體情況進行優(yōu)化和調整。
好啦，外泌體提取的具體方法及步驟我們就簡單介紹到這里啦，同學們有沒有一個簡單的了解呢？不懂得可以給客服留言技術給您詳細解答。下一篇再詳細為大家介紹如何正確提取外泌體，普拉特澤生物誓讓大家透徹學習提取外泌體的過程。當然若果您有提取外泌體或其他醫(yī)學科研實驗外包的需求，歡迎隨時咨詢哦
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