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    雙熒光素酶報告系統（Dual-Luciferase Reporter Assay System）是一種在生物學研究中廣泛應用的技術，也是近些年生物學研究的熱門研究工具之一。普拉特澤生物實驗室已經承接雙熒光素酶實驗上百例；可外包更多分子檢測實驗讓我們從系統原理、組成、主要應用、實驗流程、優勢及局限性等方面進行介紹一下吧~
基本原理
熒光素酶反應：熒光素酶是一類能夠催化熒光素發生氧化反應并發出熒光的酶。在雙熒光素酶報告系統中，常用的是螢火蟲熒光素酶（Firefly Luciferase）和海腎熒光素酶（Renilla Luciferase）。螢火蟲熒光素酶可以催化熒光素在 ATP、鎂離子等存在的條件下與氧氣發生反應，產生黃綠色熒光；海腎熒光素酶則催化腔腸素與氧氣反應，產生藍色熒光。

報告基因的應用：將感興趣的基因的調控元件（如啟動子、增強子等）與熒光素酶基因構建成報告基因載體。當這些調控元件受到細胞內各種因素的影響時，會調控熒光素酶基因的表達，進而通過檢測熒光素酶的活性來反映調控元件的活性以及相關基因的表達情況。在雙熒光素酶報告系統中，通常會同時使用兩種熒光素酶，一種作為實驗報告基因，另一種作為內參報告基因，用于校正實驗誤差。

系統組成

報告基因載體

基因轉錄調控研究：可以用于確定特定基因的啟動子區域中是否存在特定轉錄因子的結合位點，以及這些轉錄因子對基因轉錄的激活或抑制作用。

miRNA 功能研究：通過將 miRNA 的靶基因的 3'UTR 區域克隆到熒光素酶基因的下游，構建報告基因載體。若 miRNA 能夠與靶基因的 3'UTR 結合，會導致熒光素酶基因的表達受到抑制，熒光信號減弱，從而驗證 miRNA 與靶基因的相互作用。       

藥物研發：在藥物研發過程中，可用于篩選能夠調節特定基因表達的藥物分子。也可以評估藥物對細胞信號通路的影響，為藥物的作用機制研究提供依據。
實驗流程

細胞轉染：將構建好的螢火蟲熒光素酶報告基因載體和海腎熒光素酶內參載體共轉染到目標細胞中。可以使用脂質體轉染試劑、電穿孔等方法將載體導入細胞。