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?DNA甲基化實驗介紹【科研小白】

2022-05-13 10:27:04

來源/作者:普拉特澤-生物醫學整體課題外包平臺

        DNA甲基化實驗介紹由普拉特澤生物總結分享。DNA甲基化為DNA化學修飾的一種形式,能夠在不改變DNA序列的前提下,改變遺傳表現。普拉特澤生物表達檢測平臺為廣大科研人員提供DNA甲基化檢測實驗,用豐富的實戰操作經驗給出高質的結果。


         那么現在我們來看看,什么是DNA甲基化呢?

          DNA甲基化(DNA methylation)為DNA化學修飾的一種形式,能夠在不改變DNA序列的前提下,改變遺傳表現。所謂DNA甲基化是指在DNA甲基化轉移酶的作用下,在基因組CpG二核苷酸的胞嘧啶5號碳位共價鍵結合一個甲基基團。大量研究表明,DNA甲基化能引起染色質結構、DNA構象、DNA穩定性及DNA與蛋白質相互作用方式的改變,從而控制基因表達。

          DNA甲基化的實驗原理是:基因組中DNA的甲基化模式是通過DNA甲基轉移酶實現的。DNA甲基化酶分為2類,即維持DNA甲基化轉移酶(Dnmtl或維持甲基化酶)和從頭甲基化酶。根據序列的同源性和功能,真核生物DNA甲基化轉移酶又分為4類:Dnmtl/METlDnmt2、CMTsDn-mt3Dnmtl/MET類酶參與CG序列甲基化的維持。CMTs類酶僅發現在植物中,主要特征是它的催化區T包埋染色體的主區,并且特異性地維持CG序列的甲基化。Dnmt3類酶在小鼠、人類和斑馬魚中得到鑒定.Dnmt3aDnmt3b在未分化的胚胎干細胞中高度表達,但在體細胞中表達水平很低。它們的主要作用是從頭甲基化,但對維持甲基化也起到一定的作用,并且負責重復序列的甲基化。

            DNA甲基化類型:DNA甲基化反應分為2種類型。一種是2條鏈均未甲基化的DNA被甲基化,稱為從頭甲基化(denovo methylation);另一種是雙鏈DNA的其中一條鏈已存在甲基化,另一條未甲基化的鏈被甲基化,這種類型稱為保留甲基化(maintenance methylation)。

            DNA甲基化(methylation)是真核細胞正常而普遍的修飾方式,也是哺乳動物基因表達調控的主要表觀遺傳學形式。DNA甲基化后核苷酸順序及其組成雖未發生改變,但基因表達受影響。盡管甲基化修飾有多種方式,被修飾位點的堿基可以是腺嘌呤的N-6位、胞嘧啶的N-4位、鳥嘌呤的N-7位和胞嘧啶的C-5位,它們分別由不同的DNA甲基化酶催化,但大多發生在基因啟動子區CpG島上。DNA甲基化時,胞嘧啶從DNA雙螺旋上突出,進入能與酶結合的裂隙中,在胞嘧啶甲基轉移酶催化下,把活性的甲基從S一腺苷甲硫氨酸轉移至胞嘧啶5位上,形成5一甲基胞嘧啶(5MC)?;騿幼訁^的甲基化可導致轉錄沉寂。

             細胞發育過程中,各種表觀遺傳學現象之間不是孤立存在而是密切聯系的。DNA甲基化同組蛋白甲基化共同調控基因表達的現象最早在鏈孢霉(Neurospora crassa)中得到證實,進一步的生化研究結果表明,DNA甲基化是受組蛋白甲基化調節的。對哺乳動物的研究發現,DNA甲基化是建立和維持其他表觀遺傳學現象的基礎,比如DNA甲基化位點可以募集諸如組蛋白去乙酰化酶等具有抑制功能的復合物,同時除掉該位點附近的組蛋白乙?;瘶擞洝R灿醒芯空J為,DNA甲基化是受組蛋白修飾調控的,有報道稱組蛋白修飾H3K9me能夠促進DNA甲基化的進程。

              那么關于甲基化的簡單介紹,我們就說到這里啦,更多關于DNA甲基化的問題歡迎隨時留言哦。