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闡述siRNA和shRNA在細胞實驗中的使用差異

2024-09-20 17:14:31

來源/作者:普拉特澤-生物醫學整體課題外包平臺

    在細胞實驗中,siRNA(小干擾RNA)和shRNA(短發夾RNA)作為兩種重要的基因沉默工具,它們在使用上存在著明顯的差異。普拉特澤生物工具平臺承接shRNA載體構建技術上百例,早就為大家把實驗過程中要踩的雷、吃的虧幫大家吃完了,現在我們就來看看——

以下是對這些差異的詳細闡述:

1. 結構與構建方式

?siRNA?:

結構:siRNA是一種雙鏈RNA分子,長度通常在21-23個核苷酸之間,其3'端常有兩個游離的堿基。這種結構使得siRNA能夠直接與目標mRNA結合,從而引發RNA干擾(RNAi)效應。

構建方式:siRNA通常是人工化學合成的,通過針對目標基因的特定序列進行設計,確保其與目標mRNA的高效結合。


?shRNA?:

結構:shRNA是一種具有莖環結構的單鏈RNA分子,其長度也在19-25個核苷酸范圍內。這種特殊的莖環結構使得shRNA在細胞內能夠被Dicer酶識別并切割成siRNA,進而發揮基因沉默作用。

構建方式:shRNA通常是通過基因克隆技術構建在質粒或病毒載體上,這些載體在細胞內能夠持續表達shRNA,從而不斷產生siRNA。


2. 作用機制

?siRNA?:

當siRNA進入細胞后,它會與RNA誘導的沉默復合體(RISC)結合,形成RISC-siRNA復合物。這個復合物能夠特異性地識別并降解與siRNA互補的目標mRNA,從而實現基因沉默。

?shRNA?:

shRNA進入細胞后,首先被Dicer酶識別并切割成siRNA。隨后,這些siRNA通過與RISC結合,同樣能夠特異性地降解目標mRNA。由于shRNA是通過載體在細胞內持續表達的,因此它能夠不斷地產生siRNA,從而維持更長時間的基因沉默效果。


3. 穩定性與持久性

?siRNA?:

由于siRNA是化學合成的,它在細胞內的穩定性相對較低。一旦進入細胞,siRNA會逐漸被降解,因此其基因沉默效果通常只能維持數天到一周左右。

?shRNA?:

由于shRNA是通過載體在細胞內持續表達的,因此它能夠不斷地產生siRNA,從而維持更長時間的基因沉默效果。在某些情況下,shRNA甚至可以整合到細胞的基因組中,實現遺傳性的基因沉默。


4. 應用場景

?siRNA?:

適用于需要快速、短期基因沉默效果的實驗場景,如急性基因功能研究、藥物篩選等。siRNA的即時性和高效性使得它成為這些領域中的理想選擇。

?shRNA?:

我們的團隊由經驗豐富的生物學家、技術專家及資深工程師組成,他們不僅擁有深厚的學術背景,更具備將理論轉化為實踐的卓越能力。在這里,每一個細節都被精心雕琢,每一次操作都力求完美。

適用于需要長期、穩定基因沉默效果的實驗場景,如細胞系構建、基因功能長期觀察、體內基因治療等。shRNA的持續性和穩定性使得它成為這些領域中的重要工具。

綜上所述,siRNA和shRNA在細胞實驗中的使用差異主要體現在結構與構建方式、作用機制、穩定性與持久性以及應用場景等方面。根據實驗的具體需求和目的,研究人員可以選擇合適的基因沉默工具來開展實驗工作。

要資質有資質

要經驗有經驗

要案例有案例

好,siRNA和shRNA在細胞實驗中的使用差異就介紹到這里啦~

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