
EMSA測定需要多少量的蛋白標記的探針?
2023-04-21 11:35:52
來源/作者:普拉特澤-生物醫學整體課題外包平臺
在EMSA實驗中我們經常會遇見各種各樣的實驗問題,現在普拉特澤實驗室要為大家解答之前提出的經常會遇見的問題,其中之一那就是在EMSA測定需要多少量的蛋白標記的探針?現在我們就來看看吧~
EMSA(Electrophoretic Mobility Shift Assay)實驗中所需的蛋白標記探針量可以根據具體實驗目的和樣品情況而定,需要考慮以下因素:
1. 核酸探針大小:一般來說,小于100 bp的核酸片段需要更少的蛋白;大于500 bp的核酸片段可能需要較多的蛋白。
2. 蛋白質性質和濃度:一些蛋白質可能需要更多的核酸探針來形成復合物。 在實驗之前應進行探針與蛋白間結合反應的試驗,確定試驗體系最適合的蛋白質/探針比例。
3. 核酸探針標記方式:不同的標記方法會對核酸探針稀釋度產生影響。有時減小放射性核酸探針的用量可能為簡化操作提供了方便。
一般來說,最好在每個實驗條件下進行探針用量的測試,并根據結果進行調整。通常建議使用約50-200 fmol的標記探針,同時增加控制實驗組以幫助正確解讀結果。

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