EMSA實驗過程膜沒有一直處于濕潤狀態怎么辦？
2023-04-21 13:43:50
來源/作者：普拉特澤-生物醫學整體課題外包平臺
普拉特澤生物為廣大生命科學研究人員提供EMSA實驗，可根據實方案的要求選擇不同的檢測方法，本文就跟大家一起繼續探究EMSA實驗過程膜沒有一直處于濕潤狀態怎么辦的問題~~
在EMSA實驗中，保持膜處于潮濕的狀態非常重要，因為一旦膜干燥，核酸和蛋白質即使結合了也難以形成準確的電泳遷移帶。以下是關于如何保持EMSA實驗過程中膜處于潮濕狀態的建議：
1. 在制備探針、裂解細胞等操作之前，先將儀器、坩堝、電泳室等與0.5X TBE預冷卻并抹干表面，確保不會有多余的水滴污染試樣。
2. 在準備反應混合物時保持迅速操作。每次加入組分后立即輕輕搖動樣品管，將探針盡快構建復合物并防止在混合物與蛋白質溶液之間產生空氣缺陷。
3. 經過電泳后，打開電泳槽蓋子，用吸水紙輕輕拍干之前被液體封蓋的探針上覆蓋物的外側，將多余的液滴從膜表面吸走。
4. 如果您長時間無法進行下一個步驟，請在相對潮濕環境下用濕滴頭蓋好燒杯或樣品管中的反應液，并密封冷藏。在實驗結束后，將帶有反應混合物的膜立即轉移到濕濾紙上并加蓋保鮮膜，避免其完全干燥。
綜上所述，在EMSA實驗過程中盡可能將探針/樣品置于潮濕環境內，以防止膜的干燥。這可以通過快速操作、用紙巾輕輕拍干膜表面等方式進行有效地實現。
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