關節炎動物模型造模步驟【關節炎模型外包】
來源/作者:普拉特澤-生物醫學整體課題外包平臺
關節炎模型造模實驗步驟由普拉特澤生物分享,上期我們分享了《關節炎造模的造模方法》,骨關節炎以進行性的關節軟骨退變、滑膜炎癥、軟骨下骨改變和骨贅形成為特征,關節炎動物模型可以直觀研究關節炎病的致病機制發病原因等,是臨床研究關節炎的重要方法。普拉特澤生物動物實驗平臺長期承接關節炎動物模型外包實驗,提供各種類型的關節炎動物模型外包服務,本文就來跟大家一起學習三種常用的關節炎動物模型造模方法:
一、前交叉韌帶橫斷模型關節炎模型
交叉韌帶是防止脛骨移位、維持膝關節穩定性的重要結構之一,與膝關節屈曲伸直位、肌肉收縮狀態、負重或非負重區都有關系。單純前交叉韌帶離斷術可以改變關節前向穩定,增大關節間活動度,增加骨摩擦,加快關節退行性變進程。
造模過程(以大鼠為例):
1、大鼠按劑量腹腔注射10%的水合氯醛進行麻醉。
2、麻醉后大鼠右后肢備皮消毒,在膝關節炎內側做一個縱向約3cm的切口,沿髕骨韌帶向上輕開一個小口,剪開肌肉,屈膝,將髕骨外翻。暴露交叉韌帶后,剪斷前交叉韌帶。
3、然后進行抽屜實驗,確認前交叉韌帶是否完全斷離,逐層縫合傷口。
二、關節腔內注射藥物關節炎模型
關節對照組與模型組大鼠在實驗過程中未發生死亡或其它異常情況,注射MSU造模2個月后,取大鼠膝關節骨組織固定,具體模型構建情況還需以病理檢測結果為準。
1、購進的SD大鼠適應性飼養3天,期間正常飲水和喂食;
2、實驗前一天對大鼠進行禁食16h,10%水合氯醛腹腔注射麻醉(0.4ml/100g);
3、剪去大鼠膝關節處毛發,暴露膝關節處皮膚,將配制好的MSU溶液稀釋至合適濃度,使用一次性注射器將5mg/50uL MSU注射到模型組大鼠的膝關節腔中,對照組注射同等體積的生理鹽水;
4、注射完成后停頓3秒左右,緩慢將注射器拔出,按壓注射點數秒,將各組大鼠放回籠內,正常飼養;
5、組織取材,每3天觀察各組大鼠狀態是否出現異常,若無異常,2個月后處死各組大鼠,取膝關節固定保存。
三、關節制動法關節炎模型
目前常采用的肢體制動體位有伸直位、屈曲位、中間位等對模型動物進行關節的機械性制動,最為經典的是Videman造模法。
造模步驟(以兔子為例):
1、動物適應性喂養動物房12h-12h晝夜交替,保證兔子自由飲水、進食,溫度23-25℃,適應性喂養一周后進入實驗。
2、兔子耳緣備皮,耳緣靜脈注射7%水合氯醛麻醉。
3、兔子后肢備皮去毛,牽拉右腿使右膝關節處于伸直位,將兔右后肢于腹股溝以下1.5cm至裸關節下3cm(趾端)先包裹醫用無菌紗布,3層左右,石膏布浸水2-3min,小心擰干水分。
4、將處理好后的石膏布于腹股溝以下1.5cm至裸關節下3cm(趾端)沿紗布繼續包裹(不可過松、過緊),約4-5層,最后用醫用膠帶纏裹固定。
5、等石膏干硬(冬季可用吹風機加熱)后,將綁好后的兔子放回兔籠。
6、制動2周軟骨病理呈早期OA改變,固定時間越長,病理程度越重。制動6周,造模關節X線出現關節間隙狹窄、唇樣增生等典型中晚期OA特征。
7、取材拍照觀察實驗樣本。
好啦,那關于骨關節炎模型的造模步驟就講完啦,希望可以幫到您~如果您覺得自己造模太繁雜有關節炎模型代做的需求,歡迎選擇普拉特澤生物~