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怎么區(qū)分IF/IHC/ICC?分別是什么意思

2022-02-23 11:10:51

來源/作者:普拉特澤-病理染色技術平臺

     對于這IF(免疫熒光)/IHC(免疫組化)/ICC(免疫細胞化學)三個應用,有一個部分大家肯定不會混的就是“免疫”,因為這三個應用都涉及到使用抗體。首先,我們先從命名出發(fā)

       Immuno-指的是免疫技術(例如,抗體和抗原的結(jié)合)

       Histo-指的是組織(細胞以及它周圍的細胞外基質(zhì))

       Cyto-指的是細胞(不包含細胞外的基質(zhì))

       Chemistry-在這里指的是化學檢測方法(例如,顏色的變化)

       Fluorescence-對被激發(fā)的熒光團的檢測

 

     按檢測技術來分,IHC和ICC其實同屬一大類,都屬與將免疫沉淀技術與化學發(fā)光技術的結(jié)合,只是檢測對象一個是組織,一個是細胞。從實驗原理及流程都大致相同,只有前期對樣本的處理有不同。IHC用的組織樣本一般會做成組織切片,ICC用的細胞樣本會做成細胞爬片。利用的指示劑都是化學顯色劑,需要的是酶促發(fā)光。而IF則屬于免疫熒光檢測了,是免疫沉淀技術與熒光標記技術結(jié)合的檢測技術,利用的是熒光基團來指示檢測結(jié)果。靠的是儀器發(fā)送激發(fā)光來顯色觀察。IF的樣本也是分為細胞和組織,所以更規(guī)范來說,我覺得應該將應用于組織的免疫熒光(IF)稱為IHF和應用與細胞的免疫熒光技術(IF)稱為ICF。它們分別意為(免疫組織熒光)Immuno histo fluorescence與Immuno cyto fluorescence(免疫細胞熒光),目前已經(jīng)有些學者在使用了,普及化也只是時間的問題。畢竟從專業(yè)角度說,我通常會從一個命名去了解內(nèi)容本身,命名的原則也源于此。以下通過幾幅圖片來具體形象的區(qū)分別一下:

   

                                                   

      IHC染色結(jié)果     

  ICC染色結(jié)果


           

      IF實驗結(jié)果


此外他們的區(qū)分還在于:

     1.化學方法染色和熒光激發(fā)染色,如果是酶促的,就是免疫化學(IHC/ICC),如果是熒光的,就是免疫熒光(IF)。

  2.標本制作:免疫熒光一般用冰凍切片,減少雜質(zhì)干擾;而酶免疫組化一般用石蠟切片冰凍切片均可以。


  3.實驗步驟:
免疫熒光染色步驟簡單,而酶免疫組化方法較為復雜,多了DAB顯色過程。
 
  4.染色后的標本保存:免疫熒光染色后的標本一般短時間拍照,時間長了熒光衰退;而酶免疫組化染色標本可以長期保存。

 
  5.
免疫組化和免疫熒光結(jié)果除了知道蛋白是在細胞漿還是細胞膜表達高些,還可以用做半定量分析。

 
  6.
免疫熒光得到的圖片是彩色的,漂亮些,可以發(fā)高檔次文章。


     時間有限,此次就給大家總結(jié)到此。相信大家和我初次看到他們一樣,想要了解更多信息,想對他們有一個清晰的認知。我一直覺得探索是永無止境的,對知識的饑餓感讓我們一直在不斷的前進,想要了解更多關于他們的秘密嗎歡迎來我們普拉特澤春風學院學習哦,線上學習,線下實操,做你們科研的擺渡人!

                
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