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酵母雙雜交實驗采用的系統有哪些?

2023-04-07 11:51:11

來源/作者:普拉特澤-生物醫學整體課題外包平臺

 

 
        上次帶大家學習了關于酵母雙雜交實驗的步驟和原理,這期普拉特澤生物繼續為大家學習酵母雙雜交實驗采用的系統有哪些,普拉特澤生物實驗平臺長期為大家提供酵母雙雜交實驗代做外包服務本文就跟大家一起學習酵母雙雜交實驗采用的系統有哪些:



酵母雙雜交實驗是一種常用的蛋白質互作研究方法,通過檢測兩個不同的蛋白質是否能夠相互結合,來推斷它們之間可能存在的相互作用關系。





                                                                                           (酵母雙雜交實驗圖)                                                                                            



下面列出幾種常用的酵母雙雜交實驗系統:



            1. Gal4系統:在該系統中,承載DNA結合域Gal4(DBD)的表達載體和承載激活域Gal4(AD)的表達載體連接后,形成一個功能完整轉

            錄因子,從而激活熒光素酶基因報告系統。


            2. LexA系統:在該系統中,LexA DNA結合域(DBD)與LexA激活域(AD)分別構建到表達載體上,當兩個載體共轉染至酵母細胞時,如

            果采用reporter construction體系,則可以依據β-galactosidase、URA3或LEU2等物質檢測雙雜交結果。


            3. T7 RNA聚合酶系統:該系統中,T7 RNA聚合酶被拆分成兩個部分,其中一個與測試蛋白(預編碼)結合,另一個與受測蛋白(靶標)

            結合,從而激活T7 RNA聚合酶的活性。


            4. 金屬感應系統:在該系統中,分別將金屬Io10 DNA結合域和MYC激活域構建到表達載體上,在轉染至酵母細胞以后,通過添加金屬子
       
           (如Cu2+、Ni2+等),使金屬離子與特定氨基酸殘基配對,從而促進兩種蛋白質間相互結合。




以上這些系統是常用的酵母雙雜交實驗系統,它們都有各自的優缺點,選擇適當的實驗系統,有助于提高實驗效率和可靠性。



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