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northern blot實驗作用和原理

2023-04-17 16:26:57

來源/作者:普拉特澤-生物醫學整體課題外包平臺

           
    
    上次為普拉特澤生物分子檢測平臺專業為大家提供Northern blot實驗詳細操作報告,普拉特澤為您提供真實、高質量的實驗結果?,F在我們來跟著技術來看看northern blot實驗作用和原理


    Northern blot是一種用于檢測RNA的分子生物學技術,與Southern blot(用于檢測DNA)和Western blot(用于檢測蛋白質)等技術類似。Northern blot通常用于檢測RNA是否存在、其大小和數量,并可定性和定量研究RNA的表達模式和調控機制。以下是northern blot的主要作用和原理。


    1. 主要作用

    Northern blot可以確定RNA是否在一個樣品中存在,并幫助確定RNA的含量。它可以幫助檢測低水平表達的RNA,從而了解RNA在某個組織或細胞類型中的表達情況。

    Northern blot可以區分不同的RNA亞型,例如小RNA和長RNA,mRNA和非編碼RNA等。通過使用DNA探針,可以鑒別與這些RNA序列特異結合的探針,以進一步確定RNA亞型的存在。

    Northen blot可以定量RNA表達水平,可以根據信號強度比較不同樣品之間同種RNA的表達水平。此外,組織和發育上的差異可以通過對不同來源RNA的表達進行比較來研究。


    2. 原理

    從樣品中提取RNA后,通過瓊脂糖凝膠電泳將RNA分離成不同的大小,然后將RNA轉移到固體支持介質例如尼龍或硝酸纖維素膜上。通過使用標記有互補序列(probe)的單鏈DNA或RNA來特異性識別Ladder以及樣本RNA而不與其他RNA結合,并且其中的放射性或非放射性等探針可以較敏感地檢測到RNA的存在。


如果特異序列為金屬離子或biotin識別基元,則可使用針對其的抗體或聯合化學發光技術來檢測RNA。通常,northern blot信息是通過比較參考RNA和目標RNA的信號強度來解釋的,可以通過量化該相對強度來獲得RNA表達水平的定量數據。




                       好啦!本期Northern blot實驗就到這里結束了~歡迎大家留言咨詢

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