一看就會的油紅O染色實驗指南【油紅O染色外包】
2023-03-22 11:27:36
來源/作者：普拉特澤-生物醫學整體課題外包平臺
大家好！今天普拉特澤生物繼續帶大家一起學習新實驗——油紅O染色實驗，油紅O染色是一種用于檢測脂肪油滴的染色方法。它的原理基于油紅O染料與脂肪油滴之間的親和性。普拉特澤生物病理實驗平臺長期為大家提供紅油O染色代做外包服務，本文跟大家分享油紅O染色實驗指南。
實驗原理
油紅O是很強的脂溶劑和染脂劑，較易與甘油三脂結合呈小脂滴狀，與磷脂結合力稍差。其染色原理一般認為是物理上的溶液作用或吸附作用，借溶液作用使脂肪染色。染料在冰凍切片內脂質的溶解度較在原溶劑中的溶解度更大，所以在染色時染料就從有機溶劑轉移入脂質而使脂肪染色。脂肪的陽性染色結果呈橘黃至紅色，具體顏色因脂質濃度而定。因此，油紅O染色方法可用于檢測組織或細胞中脂肪油滴的存在和數量，尤其適用于脂質代謝疾病的研究。
如果您想進行油紅O染色實驗，以下是一些指南：
準備標本：您可以選擇使用細胞或組織樣本。確保您的樣本是新鮮的，保存在冰箱或液氮中。
固定標本：將樣本用4％的多聚甲醛或其他合適的固定劑進行固定，保證固定劑濃度充足并確保完全固定。
化學處理：將固定的標本進行化學處理，以去除其內部的脂質和其他物質。其中的一種方法是將樣本用80％的乙醇浸泡24小時。
染色：在油紅O染色液中將標本浸泡，時間可以根據需要自行決定，一般在30分鐘至2小時之間。將標本移入去離子水或其他適合的緩沖液中沖洗，使其達到理想的染色效果。
顯微鏡檢查：將標本放在顯微鏡下檢查。您應該能夠看到樣本中的脂肪油滴，它們應該呈現出紅色。
請注意，油紅O染色實驗不僅適用于脂肪的檢測，也可以用于一些其他的實驗和研究。
接下來我們具體看看是怎樣的實驗步驟，以c57小鼠的肝臟組織為例，將實驗分為對照組和高脂模型組
對照組
模型組
將得到的實驗結論
中性脂肪：橙紅色或橘紅色
細胞核：藍色
具體的實驗步驟
1、冰凍切片厚度6～10μm，不固定或10%福爾馬林固定10min后水洗。
2、切片入蒸餾水中稍沖洗。
3、切片入70%的乙醇內浸洗20～30s。
4、切片入改良油紅O染色液中(加蓋)，密閉染色10～15min。
5、分色：入70%的乙醇內稍洗以便去除染液。
6、入蒸餾水中稍微清洗。
7、Mayer蘇木素染色液復染核1～2min。
8、(可選)1%的鹽酸溶液稍微分化一下。
9、(可選)自來水漂洗10min 或稀碳酸鋰溶液中促藍。
10、入蒸餾水中稍微清洗。
11、用濾紙吸干周圍水分。
12、甘油明膠或阿拉伯糖膠封固。
13、采圖。（染色結果不能長期保存，應盡快觀察及照相）
今天關于紅油O染色的實驗指南就分享到這兒啦~如果您在實驗過程中遇到技術問題，或者需要實驗外包和代做，可與我們技術老師聯系：18570028002（微信同號）
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