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        油紅O染色實驗步驟與注意事項脂肪染色實驗步驟由普拉特澤生物為大家分享。普拉特澤生物病理實驗平臺為廣大科研人員提供長期穩定的油紅O染色實驗外包服務，歡迎咨詢。本文給大家簡單介紹一下油紅O脂肪染色實驗的詳細操作步驟：

        一、油紅O染色實驗準備

        1、儀器耗材：生物組織攤烤片機、3DHISTECH掃描儀、顯微鏡、蓋玻片、載玻片

        2、染色試劑：普拉特澤改良油紅O染色液、甘油明膠、無水乙醇、二甲苯

        3、待測組織的冰凍切片

        二、油紅O染色實驗步驟

        1、冰凍切片厚度6～10 μm，不固定或10%福爾馬林固定10 min后水洗。

        2、切片入蒸餾水中稍沖洗。

        3、切片入70%的乙醇內浸洗20～30 s。

        4、切片入改良油紅O染色液中(加蓋)，密閉染色10～15 min。

        5、分色：入70%的乙醇內稍洗以便去除染液。

        6、入蒸餾水中稍微清洗。

        7、蘇木素染色液復染核1～2 min。

        8、(可選)1%的鹽酸溶液稍微分化一下。

        9、(可選)自來水漂洗10 min或稀碳酸鋰溶液中促藍。

        10、入蒸餾水中稍微清洗。

        11、用濾紙吸干周圍水分。

        12、甘油明膠或阿拉伯糖膠封固。

        三、油紅O染色注意事項

        1、石蠟切片不能用于油紅O染色，原因在于石蠟包埋過程中需要脫水，脫水過程中需要乙醇-二甲苯和石蠟，二甲苯是有機溶劑，會把中性脂肪溶解；、

        2、 冰凍切片準備時，包埋的降溫過程建議選擇干冰，原因在于若選擇液氮降溫過程較強烈，可能導致組織內部炸裂，而干冰降溫的過程比較緩和，染出來的片子比較好看；

        3、切片的厚度要稍微厚一些，建議選擇8-10 μm；

        4、實驗設計建議設計陰性對照和陽性對照，如陽性對照可以用脂質豐富的肝臟組織等，陰性對照可以根據文獻來選擇無脂肪沉積的組織。

        好啦，那關于油紅O脂肪染色實驗步驟和注意事項小編就簡單介紹到這里啦，還有什么不懂得可以直接留言哦，小編會隨時查看將您的問題咨詢技術后寫成技術答疑供大家一起學習進步喲~歡迎留言！