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        植物組織DNA提取步驟由普拉特澤生物技術分享，DNA全稱是脫氧核糖核酸，普拉特澤生物分子檢測平臺為大家提供各種分子檢測外包實驗，積累了大量實操經驗，本文就跟大家分享植物組織DNA提取的實驗步驟~

        一、植物組織DNA提取儀器與設計準備

        實驗儀器：高速離心機；烘箱；冰箱；水浴鍋；高壓滅菌鍋；Nanodrop。

        實驗試劑：玻璃珠，十二烷基磺酸鈉(SDS)；三羥甲基氨基甲烷（Tris）；乙二胺四乙酸（EDTA）；氯化鈉；苯酚；氯仿；無水乙醇等。

        二、植物組織DNA提取步驟

        植物組織的DNA提取通常采用機械研磨的方法破碎植物的組織和細胞，由于植物細胞勻漿含有多種酶類(尤其是氧化酶類)對 DNA 的抽提產生不利的影響，在抽提緩沖液中需加入抗氧化劑或強還原劑(如巰基乙醇)以降低這些酶類的活性。在液氮中研磨，材料易于破碎，并減少研磨過程中各種酶類的作用。詳細操作步驟如下：

    1、SDS 提取緩沖液在 65℃水浴中預熱。

    2、將葉片置于 1.5ml 離心管中，液氮速凍，組織研磨器打樣。

    3、加入 700 ml 的 SDS 提取緩沖液，渦旋搖勻。

    4、置于 65℃的水浴中，每隔 10 min 輕輕搖動，30 min 后取出。5.加入 200 ml KAc 溶液，搖勻，放入-20℃冰箱 30 min。

    5、10000 rpm 離心 5 min，上清移至新離心管中，12000 rpm 離心 5 min。

    6、上清移至新離心管中，加入 700 ml 異丙醇， -20℃冰箱 30 min。

    7、10000 rpm 離心 5 min，棄上清，加入 500 ml 70%乙醇漂洗。

    8、棄液體，晾干。

    9、DNA 純度與濃度測定 （使用 nanodrop）。

              DNA 純度：DNA 的 OD260/OD280 一般為 1.8 左右。

              OD260/OD280 ? 1.8：說明較純；

              OD260/OD280 > 1.8：說明可能有 RNA 污染；

              OD260/OD280 < 1.8：說明可能有蛋白質污染。

        三、植物組織DNA提取注意

    1. 葉片磨得越細越好。

    2. 注意移液器的正確使用。

    3. 由于植物細胞中含有大量的 DNA 酶，因此，除在抽提液中加入 EDTA 抑制酶的活性外，第一步的操作應迅速，以免組織解凍，導致細胞裂解，釋放出 DNA 酶，使 DNA 降解。

    好啦，那植物組織DNA提取步驟就講完啦，如果您還有其他的問題或有分子檢測實驗外包的需求歡迎隨時聯系普拉特澤生物~