什么是RIP檢測?【RIP檢測外包】
來源/作者:普拉特澤-生物醫(yī)學(xué)整體課題外包平臺
大家好~!今天普拉特澤生物跟大家一起學(xué)習(xí)的實驗是RIP—RNA結(jié)合蛋白免疫沉淀實驗。RIP檢測實驗是應(yīng)用于蛋白與RNA互作關(guān)系的重要參考,普拉特澤生物分子檢測平臺長期為大家提供RIP檢測代做服務(wù),歡迎隨時咨詢。
核酸和蛋白質(zhì)是組成生命的主要物質(zhì),研究細(xì)胞內(nèi)RNA與蛋白結(jié)合情況,可以了解轉(zhuǎn)錄后調(diào)控網(wǎng)絡(luò)的動態(tài)過程,幫助我們發(fā)現(xiàn)的miRNA的的的的的調(diào)節(jié)靶點,RIP檢測實驗是應(yīng)用于蛋白與RNA互作關(guān)系的重要參考。
RIP技術(shù)(RNA Binding Protein Immunoprecipitation,RNA結(jié)合蛋白免疫沉淀),是研究細(xì)胞內(nèi)RNA與蛋白結(jié)合情況的技術(shù)。運用針對目標(biāo)蛋白的抗體把相應(yīng)的RNA-蛋白復(fù)合物沉淀下來,然后經(jīng)過分離純化就可以對結(jié)合在復(fù)合物上的RNA進(jìn)行分析;即用抗體或表位標(biāo)記物捕獲細(xì)胞核內(nèi)或細(xì)胞質(zhì)中內(nèi)源性的RNA結(jié)合蛋白,防止非特異性的RNA的結(jié)合,免疫沉淀把RNA結(jié)合蛋白及其結(jié)合的RNA一起分離出來,結(jié)合的RNA序列通過microarray(RIP-Chip),定量RT-PCR或 高通量測序(RIP-Seq)方法來鑒定。RIP可以看成是普遍使用的染色質(zhì)免疫沉淀ChIP技術(shù)的類似應(yīng)用,但研究對象是RNA-蛋白復(fù)合物而不是DNA-蛋白復(fù)合物。
RIP檢測實驗原理:
1. 用抗體或表位標(biāo)記物捕獲細(xì)胞核內(nèi)或細(xì)胞質(zhì)中內(nèi)源性的RNA結(jié)合蛋白。
2. 防止非特異性的RNA的結(jié)合。
3. 免疫沉淀把RNA結(jié)合蛋白及其結(jié)合的RNA一起分離出來。
4.結(jié)合的RNA序列通過microarray(RIP-Chi),定量RT-PCR或高通量測序(RIP-Seq)方法來鑒定。
好啦,關(guān)于RIP檢測基礎(chǔ)原理的介紹就到這里啦,有更多不懂的同學(xué)歡迎留言咨詢哦,更有需要RIP檢測外包的同學(xué)歡迎聯(lián)系。