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        大家好！今天普拉特澤生物繼續帶大家一起學習新實驗——甲苯胺藍染色，甲苯胺藍染色是病理學中常用的特殊染色，用于顯示各種組織成分、細胞等。普拉特澤生物病理實驗平臺長期為大家提供甲苯胺藍染色代做外包服務，本文跟大家分享動物組織樣本甲苯胺藍染色的實驗步驟：

        一、甲苯胺藍染色實驗原理與準備

        甲苯胺藍染色原理：甲苯胺藍(Toluidine Blue)是一種常用的人工合成染料，屬于醌亞胺染料類。這類染料主要含有胺基和醌型苯環兩個發色團，從而成色原顯色。甲苯胺藍中的陽離子有染色作用，組織細胞的酸性物質與其中的陽離子相結合而被染色。甲苯胺藍不僅含有兩個發色團，還含有兩個助色團，能促使染料產生電離成鹽類，幫助發色團對組織產生染色力，使切片上的組織細胞著色，可染細胞核使之呈藍色。甲苯胺藍染色液(Toluidine Blue,1%,硼酸鹽法)由于硼酸鹽緩沖液呈強堿性，更利于組織細胞的著色。

        儀器準備：生物組織攤烤片機、切片機、顯微鏡、蓋玻片、載玻片

        試劑準備：甲苯胺藍染色液、中性樹膠、無水乙醇、二甲苯

        二、甲苯胺藍染色實驗步驟（以動物組織為例）

        1、脫蠟

        （1）70℃烤片5 min；

        （2）二甲苯（I）中脫蠟10 min；

        （3）二甲苯（II）中脫蠟10 min；

        （4）100%乙醇（I）中5 min洗去二甲苯；

        5) 100%乙醇（II）中5 min洗去二甲苯；

        2、水化

        （1）95%乙醇中水化1 min；

        （2）85%乙醇中水化1 min；

        （3）75%乙醇中水化1 min；

        （4）蒸餾水中水化待用；

        3、染色

        （1）甲苯胺藍染色液染色30 min；

        （2）流水沖洗2 min；

        （3）1%鹽酸酒精分化至軟骨細胞呈紫藍色清楚可見；

        （4）流水沖洗切片5 min；

        （4）蒸餾水過洗1-2 s；

        4、脫水

        （1）85%乙醇脫水1 min；

        （2）95%乙醇脫水1 min；

        （3）無水乙醇脫水1 min；

        （4）無水乙醇脫水1 min；

        5、透明

        （1）二甲苯（I）透明2 min；

        （2）二甲苯（II）再次透明2 min；

        6、封片、鏡檢

        在石蠟切片的中央滴加一滴中性樹膠，蓋上蓋玻片封固，顯微鏡下觀察拍照。

        好啦，動物組織的甲苯胺藍染色實驗步驟咱們就介紹完啦，如果您也對甲苯胺藍染色感興趣或正在準備甲苯胺藍染色實驗的話歡迎隨時咨詢普拉特澤生物~