EMSA凝膠遷移實驗原理介紹
來源/作者:普拉特澤-生物醫學整體課題外包平臺
EMSA凝膠遷移或電泳遷移率實驗實驗介紹由普拉特澤生物旗下科研培訓品牌—春風學院總結分享,文尾有EMSA實驗理論與實操視頻教程供大家學習。EMSA是一種研究DNA結合蛋白和其相關的DNA結合序列相互作用的技術,而普拉特澤生物作為專門承接各類生物實驗代做服務的科研企業,在成百上千次的EMSA實驗操作中積累了豐富的理論與實操技術經驗,能在各種情況下的到EMSA實驗的完美結果,今天小編就簡單介紹一下這個實驗,一起來學習吧!
凝膠遷移或電泳遷移率實驗(EMSA)是一種研究DNA結合蛋白和其相關的DNA結合序列相互作用的技術,可用于定性和定量分析。這一技術最初用于研究DNA結合蛋白,已用于研究RNA結合蛋白和特定的RNA序列的相互作用。
通常將純化的蛋白和細胞粗提液和32P同位素標記的DNA或RNA探針一同保溫,在非變性的聚丙烯凝膠電泳上,分離復合物和非結合的探針。DNA-復合物或RNA-復合物比非結合的探針移動得慢。同位素標記的探針依研究的結合蛋白的不同,可是雙鏈或者是單鏈。當檢測如轉錄調控因子一類的DNA結合蛋白,可用純化蛋白,部分純化蛋白,或核細胞抽提液。在檢測RNA結合蛋白時,依據目的RNA結合蛋白的位置,可用純化或部分純化的蛋白,也可用核或胞質細胞抽提液。競爭實驗中采用含蛋白結合序列的DNA或RNA片段和寡核苷酸片段(特異),和其它非相關的片段(非特異),來確定DNA或RNA結合蛋白的特異性。在競爭的特異和非特異片段的存在下,依據復合物的特點和強度來確定特異結合。
凝膠遷移或電泳遷移率實驗(EMSA)可以:
1.研究DNA結合蛋白和其相關的DNA結合序列相互作用;
2.可用于DNA定性和定量分析;
3.用于研究RNA結合蛋白和特定的RNA序列的相互作用。
EMSA實驗相對來說沒有非常的復雜,關于EMSA更多理論知識與實際操作想要學習的同學歡迎點擊《EMSA 理論+實操》詳細了解實踐哦,有關于EMSA實驗更多問題的同學歡迎隨時留言,普拉特澤永遠在線~