細胞劃痕實驗操作問題答疑【細胞實驗外包】
2022-09-06 11:14:50
來源/作者：普拉特澤-生物醫學整體課題外包平臺
大家好！今天普拉特澤生物帶大家學習的是細胞劃痕實驗的常見問題回答。細胞劃痕實驗是觀察掌握細胞遷移實驗過程中細胞活動的重要實驗方法，普拉特澤生物——細胞實驗平臺操作各類細胞的劃痕實驗上百例，專業代做細胞劃痕實驗和各種細胞實驗，對大家提出的各種關于細胞劃痕實驗的問題都一一做出了回答，希望能對迷茫的你起到一些幫助~
問題一：細胞劃痕實驗為什么這么重要？
答：因為細胞劃痕實驗是觀察細胞遷移活動的重要技術手段，而且簡單快捷、經濟實惠（劃重點！！！）。細胞遷移參與到很多的如免疫、炎癥、腫瘤轉移、損傷修復、胚胎發育等生理和病理的活動中，有重要的臨床研究意義。
問題二：細胞劃痕實驗為什么一般選擇6孔板？
答：因為6孔板大小適中，可保證有相當距離的平直劃痕，便于觀察;當然若是需要高通量初篩時，也可以用12或者24孔板。
問題三：為什么細胞接種密度要求過夜100%融合？
答：如果過夜后細胞=沒有100%融合，雖然可以適當延長培養時間，但因細胞密度已經很大，所以細胞狀態會逐漸變差，后續細胞可能不遷移而是凋亡。
問題四：怎樣避免細胞增殖對細胞遷移實驗造成的假陽性結果？
答：操作如下
1、使用無血清或低血清培養基(<2%)可降低細胞增殖對實驗結果的影響
2、一般認為24h為細胞的一個周期，在選取合適的時間點(6，12，24h)檢測劃痕寬度時，最好不要超過細胞一個周期的時間
3、如果要單純考慮細胞遷移，可以先用絲裂霉素(1ug/ml)處理1h，抑制細胞的分裂。
問題五：結果怎樣拍照？
答：按照6孔板背后畫線的垂直方向劃痕，可以形成若干交叉點，劃痕一次與5條定位線相交，就有10個可固定監測點，以解決了前后觀察時位置不固定的問題。
問題六：細胞不遷移怎么回事？
答：避開細胞狀態的影響，需要考慮細胞自身的遷移能力，并非所有細胞都適合劃痕實驗，以乳腺癌為例，乳腺癌細胞MCF-7幾乎很難遷移，而MDA-MB-231具有很強遷移性。
問題七：結果統計中，細胞計數和統計面積那個好用？
答：根據細胞劃痕實驗的實驗結果選擇。如果細胞遷移輪廊比較清晰，并且遷移數量不多，我們可以選擇細胞計數；但如果細胞數比較多，連片生長，那么統計面積比細胞計數的方式更簡便且客觀。
問題八：細胞劃痕技術有什么不足嗎？
答：細胞劃痕實驗的不足主要包括：
1、適用的細胞類型范圍小，一是需要遷移強的細胞，而且對無血清的環境有較強的忍受力
(至少24h)然而很多腫瘤細胞系在無血清培養下，12h細胞凋廣就超過50%，因此細胞劃痕法對部分腫瘤細胞并不適用。
2、自身操作的實驗誤差，如劃痕距離不一致等。
好啦，那關于細胞劃痕實驗的各種問題咱們的計數就暫時先回答到這里啦，如果您還有更多問題需要補充的話可以留言給我們，技術會及時給到回復與解答的。
當然如果您有細胞劃痕和各類細胞實驗外包與代做的需求，請一定要認準普拉特澤生物！我們下期見~
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