
細胞鐵死亡金標準
2024-11-26 16:22:11
來源/作者:普拉特澤-生物醫學整體課題外包平臺
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細胞鐵死亡(Ferroptosis)是一種新型的程序性細胞死亡形式,主要由鐵依賴性脂質過氧化物的積累導致。鐵死亡的發生機制涉及鐵代謝紊亂、氨基酸抗氧化系統失衡以及脂質過氧化物的集聚。
為了準確檢測和確認細胞鐵死亡,科學家們已經確立了多種檢測方法和指標,其中脂質過氧化物的檢測被視為鐵死亡的金標準。
脂質過氧化物的積累是鐵死亡的核心機制之一。在生理條件下,細胞內的抗氧化系統通過system XC-和GPX4等關鍵調控靶點來維持氧化還原平衡。然而,當這些系統受到干擾時,如鐵代謝紊亂導致的亞鐵離子(Fe2?)積累,會產生大量脂質活性氧(ROS),最終導致細胞死亡。

鐵死亡過程中,多不飽和脂肪酸如花生四烯酸(AA)或腎上腺酸(AdA)是最容易發生氧化反應的脂質。
這些脂質在多種酶的調控下,轉化為脂質過氧化物,如通過乙酰輔酶A合成酶長鏈家族4(ACSL4)、溶血卵磷脂酰基轉移酶3(LPCAT3)和脂肪氧合酶等酶的催化作用。

脂質過氧化物的檢測可以通過多種方法進行,其中最常用的是熒光成像技術。例如,使用Liperfluo等熒光探針可以特異性地檢測細胞內的脂質過氧化物。
當細胞發生鐵死亡時,這些探針會發出強烈的熒光信號,從而確認脂質過氧化物的積累。此外,還可以通過檢測丙二醛(MDA)等脂質過氧化產物來衡量脂質過氧化的水平。

除了脂質過氧化物的檢測,鐵死亡還可以通過其他指標進行確認。例如,細胞內的亞鐵離子(Fe2?)積累是鐵死亡的典型標志之一,可以通過比色法或熒光探針如FerroOrange進行檢測。
同時,鐵死亡過程中活性氧(ROS)的水平通常會升高,可以使用DCFH-DA或H2DCFDA等熒光探針進行檢測。此外,線粒體在鐵死亡中扮演重要角色
其形態變化和膜電位的降低也可以通過JC-1染料或電子顯微鏡觀察來評估。
值得注意的是,在進行鐵死亡檢測時,需要綜合考慮多種指標,以確保結果的準確性和可靠性。例如,可以通過細胞活性實驗(如CCK-8)來評估細胞的存活狀態,同時結合脂質過氧化物、亞鐵離子、活性氧和線粒體形態等多個指標進行綜合判斷。
此外,還可以使用鐵死亡誘導劑(如Erastin和RSL3)和抑制劑來進一步驗證鐵死亡的發生和抑制效果。

綜上所述,脂質過氧化物的檢測是確認細胞鐵死亡的金標準之一。通過熒光成像技術、比色法和多種其他指標的綜合檢測,可以準確地評估細胞是否發生了鐵死亡
為深入研究鐵死亡的機制和開發相關疾病的治療方法提供有力支持。

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