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        細胞實驗之血管生成操作步驟由普拉特澤生物給大家總結分享。血管生成是從已有的毛細血管或毛細血管后靜脈發展而形成新的血管，其對于器官生長、胚胎發育和傷口愈合在內的多種過程十分重要。普拉特澤生物——細胞實驗平臺操作血管生成實驗上百次，有豐富的多種細胞實驗經驗，下面我們就來看看常規的血管生成實驗步驟：

        一、準備基質膠

        1.實驗前一天將Matrigel置于冰盒中，放入4°C冰箱，使膠能過夜緩慢融化。(注意:同樣要準備一些4。C預冷的槍頭用于吸取Matrigel)

        2.開始實驗前，將Matrigel始終保持放在冰盒中。

        3.打開滅菊包裝，取出ibidi血管生成載玻片。

        4.每孔中加入10ul Matrigel。注意槍頭要垂直干內孔的正上方加入Matrigel，防止有Matrigel流經上孔而留下殘留膠。

        由于Matrigel流動性不強，并且有可能移液槍不準確，有可能打入10 ul的膠，卻不能填滿血管生成載玻片的下孔--這樣，必然會影響到實驗的成像結果。

        如何判斷是否加入了合適體積的Matrigel：我們只需用一張格子紙就能知道自己的移液槍調整到多少能正好把下孔填滿，垂直透過每個孔看下面的格子紙，如果格子被縮小了，那么就說明膠沒加滿，格子被放大了，那么膠就加多了，格子沒發生什么變形，這才是剛剛加滿下孔的狀態。

        二、準備凝膠

        1.蓋上ibidi血管生成載玻片的蓋子。

        2.準備一個10 cm的培養皿，放入浸過水的紙巾，制成一個濕盒。

        3.將ibidi血管生成載玻片放入培養皿中，蓋上培養皿蓋。

        4.將整個培養皿放入培養箱中，靜置30分鐘左右，等待膠凝結。

        5.等待同時準備細胞懸液。

        三、鋪細胞

        加入細胞的量直接影響實驗結果，所以在正式實驗開始之前，要對不同類型的細胞和使用數量進行預實驗。獲得最佳比例的細胞密度。

        1.準備密度為2*105cells/ml的細胞懸液，充分混勻。

        2.將膠已經凝固的ibidi 血管生成載玻片從濕盒中取出。

        3.每孔加入50 ul的細胞懸液，注意保持槍頭垂直在上孔的上方，不要接觸下孔的凝膠。可以使用排槍。

        4.同樣用格子紙查看是不是加了足夠量的液體，如果沒有，加入無細胞的培養基，使上孔液體正好加滿。

        5.蓋上蓋，靜置，一段時間后，所有細胞都會沉下去落在 Matrigel 的表面。

        四、采集圖像并統結果

        可以按照細胞的生長速度定時采集圖像，并且對其成管長度，覆蓋面積，成環數，結點數進行測量和記錄，并且對其進行統計分析

        OK！那血管生成實驗的操作步驟咱們就講解到這里啦！如果您也準備做血管生成實驗或有血管生成實驗代做的需求，可以直接留言，下期教大家如何分析血管生成實驗的數據結果，咱們下期見！