相關實驗
實驗承諾函
咨詢記錄
技術文章
城市
時間
江蘇省南通市
2025-09-06 09:27:23
江蘇省南通市
2025-09-06 01:48:00
江蘇省南通市
2025-09-06 01:46:53
江蘇省鎮江市
2025-09-05 09:00:16
江蘇省蘇州市
2025-09-05 05:40:18
陜西省西安市
2025-09-04 11:55:39
福建省廈門市
2025-09-03 20:48:52
江蘇省南通市
2025-09-03 16:16:05
江蘇省南通市
2025-09-03 04:03:46
北京市
2025-08-31 11:33:43
實驗介紹
【技術原理】
核酸具有貯存和傳遞遺傳信息等重要生物功能，是分子生物學研究的主要對象。采用常規吸附柱法抽提樣本中的DNA、RNA，為下游實驗提供高純度和高濃度的模板。
DNA提取方法：對基因組DNA的提取方法主要有 CTAB，SDS和其他如玻璃珠法，酶法等。質粒DNA的提取主要有堿裂解法和煮沸法；線粒體，葉綠體DNA的提取主要有差速離心結合SDS法。
RNA提取方法：異硫氰酸胍/苯酚法。基本實驗原理：細胞在變性異硫氰酸胍作用下裂解，核酸釋放。DNA和RNA在特定pH下溶解度不同而分別于體系的中間相與水相，得以分離。進行有機溶劑抽提，沉淀，得到純凈RNA。
【實驗流程】
交付標準
常見問題
【常見問題】
1、洗脫產物DNA量很少或沒有
a、樣品中細胞濃度低；
b、樣品裂解不充分；
c、DNA吸附不充分。
2、DNA影響后續酶反應實驗
a、乙醇有殘留；空離完成后再將吸附柱置室溫或溫箱2min左右，徹底去除乙醇。
3、核酸降解
a、樣本不新鮮（尤其對于RNA而言）；
b、前處理不當（樣本量過大）。
送檢與交付標準
| 樣品類型 | 樣品需求 | 保存條件 | 運輸條件 | 備注 |
|---|---|---|---|---|
| 動物組織 | 單個樣品>0.1g，2mlEP管或凍存管裝，不要過量；樣本應盡量新鮮，如不能立即提取蛋白或核酸，應液氮速凍后凍存于-80℃或更低，凍存樣本避免反復凍融以致降解 | -80℃ | 干冰 | 所有樣本均須有唯一標記，且標記清晰可識 |
| 種子樣本 | 去殼新鮮或保存于液氮中的的種子樣本，單個樣品>0.2g。 | -80℃ | 干冰 | |
| 貼壁/懸浮細胞 | 1. 總RNA或蛋白：106cell/指標、漿/核RNA或蛋白：107cell/指標、線粒體RNA或蛋白：2*107 cell/指標，樣本盡量新鮮，細胞收取后直接加Trizol（QPCR檢測）或直接凍存于-80℃ 2. 若細胞處理（加藥、轉染、感染）后狀態差應酌情加大收樣量 | -80℃ | 干冰 | |
| 全血/血清樣品 | 用抗凝管保存的外周血 5~10ml，骨髓 1~3ml； -80℃保存不超半周的白細胞勻漿>400μl，每 400μl 加入 400μl Trizol。 | -80℃ | 干冰 | |
| 石蠟包埋樣品 | 由標準的石蠟包埋盒包埋的石蠟塊，有效厚度大于 0.1cm； 新鮮的 FFPE 組織切片，每片厚度不超過 10μm，2~8 張，表面積不超過 250mm2。 | -20℃ | 冰袋 | |
| 抗體 | 1. 按樣本種屬提供滿足相應實驗要求的抗體； 2. 按抗體說明書要求寄送，盡量避免分裝；如分裝，確保量足夠進行實驗，并提供抗體說明書。 3.保存抗體的抗體管上應有能夠識別此抗體的標記，抗體的量應大于實驗所需的量。 | -20℃ | 冰袋 | |
| 引物 | 干粉，≥1OD，如進行預實驗，每個基因至少提供兩對引物， 附帶公司引物合成單。 | -20℃ | 冰袋或常溫 |
電話：400-691-6686
在線時間：8:00-24:00
微信關注公眾號
湘公網安備