相關實驗
實驗承諾函
咨詢記錄
技術文章
城市
時間
國外
2025-09-06 01:47:00
江蘇省南通市
2025-09-05 23:17:07
江蘇省蘇州市
2025-09-05 05:40:21
江蘇省鎮江市
2025-09-04 18:29:53
北京市
2025-09-04 13:12:00
廣東省深圳市
2025-09-02 03:24:22
北京市
2025-08-31 14:51:47
江蘇省鎮江市
2025-08-30 19:12:29
江蘇省蘇州市
2025-08-29 05:33:53
福建省廈門市
2025-08-27 13:28:08
實驗介紹
【應用簡介】
腫瘤細胞通過膜表面特定受體與基質或基底膜的層粘連蛋白、纖維連接蛋白和IV型膠原等相粘連，然后腫瘤細胞可釋放蛋白水解酶或激活基質中已存在的酶原，使基質成分降解，最后腫瘤細胞運動而充填到被水解了的基質的空隙處，如此三個過程不斷重復腫瘤細胞不斷向深層侵襲。
【技術原理】
本實驗采用的Matrigel是從小鼠EHS肉瘤中提取的基質成分，含有LN、IV型膠原等。將Matrigel鋪在Transwell侵襲小室的多孔濾膜上，能形成與天然基底膜極為相似的基底膜結構。具有侵襲能力的細胞在趨化劑誘導下可穿過多孔濾膜，侵襲細胞經染色后，在顯微鏡下觀察和計數。
【實驗方法】
Step1：制備條件培養基
Step2：包被基底膜
Step3：水化基底膜
Step4：接種細胞
Step5：培養細胞
Step6：固定及染色
Step7：鏡檢
案例展示
技術總結
1、24孔板下室一般加入600ul的培養基，特別注意的是，下層培養液和小室間常會有氣泡產生，一旦產生氣泡，下層培養液的趨化作用就減弱甚至消失了，在種板的時候要特別留心，一旦出現氣泡， 要將小空提起，去除氣泡，再將小室放進培養板；
2、接種的細胞應選擇處于對數生長期且狀態良好，細胞計數需準確；
3、待細胞遷出，且形態展開后即可固定染色；
4、染色后，可用棉簽輕輕擦掉上層未遷出細胞；
5、拍照時，同一視野不可重復拍照，膜上小孔清晰，細胞形態明顯，所有照片的背景需統一。
送檢與交付標準
| 樣品類型 | 樣品需求 | 保存條件 | 運輸條件 | 備注 |
|---|---|---|---|---|
| 凍存細胞 | 1.取對數生長期的細胞，消化離心收集細胞，加入凍存液吹打混勻，裝入凍存管，標明細胞名稱/細胞代數，凍存細胞數量在1-5*106個/ml。 2.項目啟動后細胞復蘇，復蘇后3天反饋細胞狀態，3-5天反饋細胞污染情況，5-7天反饋支原體污染情況。 3. 細胞詳細信息（名稱、培養基和其他培養條件等，如經過特別處理需告知并提供必要的信息） | 液氮 | 干冰 | 所有樣本均須有唯一標記，且標記清晰可識 |
| 復蘇后細胞 | 1.使用T25培養瓶運輸。細胞匯合度達到60%以上，裝滿培養液，只留紐扣大小的氣泡，瓶口用封口膜封好，標明細胞名稱/細胞代數/接種時間/培養基類型，瓶子固定運輸。 2.收到細胞后3天反饋細胞狀態，3-5天反饋細胞污染情況，5-7天反饋支原體污染情況。 3. 細胞詳細信息（名稱、培養基和其他培養條件等，如經過特別處理需告知并提供必要的信息） | 常溫 | 常溫 | |
| 質粒 | 1.純度高，無內毒素，無蛋白質，基因組DNA/RNA污染，質粒A260:A280的比值在1.8-2.0之間 2.濃度不低于0.5μg/μl，總量大于100μg，無內毒素處理 3. 載體詳細信息，包括名稱、大小、抗性、熒光標記 | -20℃ | 冰袋 | |
| 病毒 | 1.慢病毒：滴度不低于1*108TU/ml，體積約200μl，標明制備時間，且沒有反復凍融 2.腺病毒：滴度不低于1*109PFU/ml，體積約200μl，標明制備時間，且沒有反復凍融 3.明確是否表達熒光標簽蛋白及其種類，最好需要提供病毒載體圖譜； | -80℃ | 干冰 |
電話：400-691-6686
在線時間：8:00-24:00
微信關注公眾號
湘公網安備