T/B/NK淋巴細(xì)胞亞群檢測(cè)
流式利用不同熒光物質(zhì)標(biāo)記的單克隆抗體，與待測(cè)成分作用，然后上流式細(xì)胞儀檢測(cè)待測(cè)細(xì)胞。待測(cè)細(xì)胞隨流動(dòng)室內(nèi)的流動(dòng)鞘液排列成單列，一個(gè)個(gè)迅速通過(guò)激光聚焦區(qū)，激光在對(duì)每個(gè)細(xì)胞進(jìn)行照射時(shí)可同時(shí)得到前向角散射和側(cè)向角散射2種散射光以及激發(fā)熒光標(biāo)記物發(fā)出的信號(hào)，利用這些信號(hào)，可計(jì)算出相對(duì)含量，從而得到細(xì)胞群的相對(duì)比值。
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實(shí)驗(yàn)介紹
【技術(shù)原理】
流式利用不同熒光物質(zhì)標(biāo)記的單克隆抗體，與待測(cè)成分作用，然后上流式細(xì)胞儀檢測(cè)待測(cè)細(xì)胞。待測(cè)細(xì)胞隨流動(dòng)室內(nèi)的流動(dòng)鞘液排列成單列，一個(gè)個(gè)迅速通過(guò)激光聚焦區(qū)，激光在對(duì)每個(gè)細(xì)胞進(jìn)行照射時(shí)可同時(shí)得到前向角散射和側(cè)向角散射2種散射光以及激發(fā)熒光標(biāo)記物發(fā)出的信號(hào)，利用這些信號(hào)，可計(jì)算出相對(duì)含量，從而得到細(xì)胞群的相對(duì)比值。
利用不同熒光物質(zhì)標(biāo)記的抗CD3、CD4、CD8、CD19、CD16、CD56單克隆抗體，與待測(cè)成分作用，然后上流式細(xì)胞儀檢測(cè)待測(cè)細(xì)胞。待測(cè)細(xì)胞隨流動(dòng)室內(nèi)的流動(dòng)鞘液排列成單列，一個(gè)個(gè)迅速通過(guò)激光聚焦區(qū)，激光在對(duì)每個(gè)細(xì)胞進(jìn)行照射時(shí)可同時(shí)得到前向角散射和側(cè)向角散射2種散射光以及激發(fā)熒光標(biāo)記物發(fā)出的信號(hào)，利用這些信號(hào)，可計(jì)算出CD3+、CD4+、CD8+、CD19+、CD16+、CD56+的相對(duì)含量，從而得到各細(xì)胞群的相對(duì)比值技術(shù)。
淋巴細(xì)胞是正常機(jī)體免疫系統(tǒng)功能最重要的一大細(xì)胞群，在免疫應(yīng)答過(guò)程中，淋巴細(xì)胞發(fā)育成為功能不同的亞群。各亞群的數(shù)量和功能產(chǎn)生異常時(shí)，就能導(dǎo)致機(jī)體免疫紊亂并產(chǎn)生病理變化。淋巴細(xì)胞亞群分析是檢測(cè)細(xì)胞免疫和體液免疫功能的重要指標(biāo)，它總體反映機(jī)體當(dāng)前的免疫功能、狀態(tài)和平衡水平，并可以輔助診斷某些疾病（如自身免疫病、免疫缺陷病、惡性腫瘤、血液病、變態(tài)反應(yīng)性疾病等），分析發(fā)病機(jī)制，觀察療效及檢測(cè)預(yù)后有重要意義。利用各種單克隆抗體與淋巴細(xì)胞表面的抗原結(jié)合，再配合多色熒光染料，通過(guò)流式細(xì)胞儀檢測(cè)分析即可以把各種不同功能的淋巴亞群區(qū)分開(kāi)來(lái)，進(jìn)而得到各亞群的相對(duì)比例。
我們的常用檢測(cè)指標(biāo)為
T淋巴細(xì)胞：CD3+CD4+CD8+
B淋巴細(xì)胞：CD3-CD19+
NK細(xì)胞：CD3-CD16+CD56
【實(shí)驗(yàn)流程】
Step1：制成單細(xì)胞懸液（組織樣本）
Step2：溶血（細(xì)胞樣本無(wú)需進(jìn)行此步驟）
Step3：離心去上清
Step4：調(diào)整細(xì)胞密度
Step5：加入相應(yīng)的標(biāo)記抗體
Step6：孵育
Step7：洗滌后離心去上清
Step8：上機(jī)檢測(cè)
案例展示
注意事項(xiàng)
1、新鮮全血應(yīng)盡快送檢，長(zhǎng)時(shí)間保存應(yīng)放置在4-8℃；
2、使用抗凝管采集，一般采血管為EDTA與肝素抗凝管；
3、抗凝血應(yīng)保證無(wú)血塊凝集。
送檢與交付標(biāo)準(zhǔn)
| 樣品類型 | 樣品需求 | 運(yùn)輸條件 |
|---|---|---|
| 組織 | 離體后組織制成單細(xì)胞懸液，加入PBS培養(yǎng)基內(nèi) | 常溫運(yùn)輸 |
| 活細(xì)胞 | 樣本量：1*106個(gè)細(xì)胞/TEST，加入PBS培養(yǎng)基內(nèi) | 常溫運(yùn)輸 |
| 血液 | 將血液采集在EDTA肝素鈉的抗凝采血管內(nèi) | 常溫運(yùn)輸 |
電話：400-691-6686
在線時(shí)間：8:00-24:00
微信關(guān)注公眾號(hào)
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